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人乳鐵蛋白（hLF）對細菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如下圖。圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點，neor為新霉素抗性基因，BLG基因為B乳球蛋白基因，GFP基因為綠色熒光蛋白基因。請回答下列問題。
菁優(yōu)網(wǎng)
（1）過程①中，不能從人肌肉細胞中提取RNA用于RT-PCR，是因為
hLF基因在人肌肉細胞中不轉(zhuǎn)錄（表達）
hLF基因在人肌肉細胞中不轉(zhuǎn)錄（表達）
。熒光RT-PCR技術(shù)所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有
逆（反）轉(zhuǎn)錄酶
逆（反）轉(zhuǎn)錄酶
、Taq酶、熒光標記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。
（2）在RT-PCR過程中，加入的引物需在
5′
5′
端添加
SalⅠ和BamHⅠ
SalⅠ和BamHⅠ
兩種限制酶的識別序列，便于hLF基因插入pEB中。利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因
能
能
（填“能”或“不能”）在物種之間交流；該技術(shù)還可用于對某些微量RNA病毒的檢測，可提高檢測的靈敏度，原因是
增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測
增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測
。
（3）過程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是
使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達（或使目的基因表達）
使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達（或使目的基因表達）
；該過程中，兩個基因共用的調(diào)控元件是BLG基因的
啟動子
啟動子
。
（4）PEBL質(zhì)粒導(dǎo)入受體細胞的方法是
脂質(zhì)體介導(dǎo)
脂質(zhì)體介導(dǎo)
，依據(jù)的主要原理是
生物膜具有一定的流動性
生物膜具有一定的流動性
。
（5）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細胞中
是否有綠色熒光
是否有綠色熒光
，以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細胞。該過程
不能
不能
（填“能”或“不能”）區(qū)分普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒。

【答案】hLF基因在人肌肉細胞中不轉(zhuǎn)錄（表達）；逆（反）轉(zhuǎn)錄酶；5′；SalⅠ和BamHⅠ；能；增加了待測RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測；使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細胞中表達（或使目的基因表達）；啟動子；脂質(zhì)體介導(dǎo)；生物膜具有一定的流動性；是否有綠色熒光；不能
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：34引用：1難度：0.6
相似題

  • 菁優(yōu)網(wǎng)1．圖示PIJ702是一種常用質(zhì)粒，其中tar為硫鏈絲菌素（一種抗生素）抗性基因；mel為黑色素合成基因，其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落；而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?；卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度（ug/mL） 0 1 2 5 10
    不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長；-表示不生長。
    （1）限制性核酸內(nèi)切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列，并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂，切割形成的末端有
     
    兩種。
    （2）以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因，與質(zhì)粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換，構(gòu)建重組質(zhì)粒pZHZ8。上述兩種質(zhì)粒經(jīng)限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    （3）導(dǎo)入目的基因時，首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞，再將重組質(zhì)粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合，在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    （4）不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌細胞，所需硫鏈絲菌素濃度至少應(yīng)在
     
    μg/mL以上，挑選成功導(dǎo)入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用，第一步需檢測受體細胞的
     
    （填“DNA”或“RNA”），檢測方法應(yīng)采用
     
    技術(shù)。

    發(fā)布：2024/11/5 22:30:2組卷：21引用：3難度：0.6

  • 2．胰蛋白酶抑制劑（TI）可抑制昆蟲蛋白酶活性，阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻，是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體，并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中，進行了一系列實驗。回答下列問題：
    （1）研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ，以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要，將處理溫度控制在90～95℃，是為了
     
    。
    （2）獲取目的基因后，為了構(gòu)建基因表達載體，還需要使用的酶是
     
    （答出2種）。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    （答出3種）等結(jié)構(gòu)。
    （3）研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測，相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析，該實驗結(jié)果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    ① ② ③
    轉(zhuǎn)基因鹽藻（A組） 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質(zhì)樣品    		 將TI注射到大白
    兔體內(nèi)，獲取TI
    抗體    		 讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測    		 有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻（B組） 無雜交帶
    陽性對照組（C組） 有雜交帶

    發(fā)布：2024/11/3 15:30:2組卷：5引用：4難度：0.7

  • 3．我國科學(xué)家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉(zhuǎn)基因抗蟲棉，下列說法錯誤的是（　?。?/h2>

    發(fā)布：2024/11/4 19:0:2組卷：1引用：1難度：0.7
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