人乳鐵蛋白（hLF）對(duì)細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開(kāi)展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究，主要流程如下圖。圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點(diǎn)，neor為新霉素抗性基因，BLG基因?yàn)锽乳球蛋白基因，GFP基因?yàn)榫G色熒光蛋白基因。請(qǐng)回答下列問(wèn)題。
（1）過(guò)程①中，不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR，是因?yàn)?hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）。熒光RT-PCR技術(shù)所用的試劑盒中通常都應(yīng)該含有 逆（反）轉(zhuǎn)錄酶逆（反）轉(zhuǎn)錄酶、Taq酶、熒光標(biāo)記的核酸探針、引物、dNTP、緩沖體系。
（2）在RT-PCR過(guò)程中，加入的引物需在 5′5′端添加 SalⅠ和BamHⅠSalⅠ和BamHⅠ兩種限制酶的識(shí)別序列，便于hLF基因插入pEB中。利用RT-PCR技術(shù)獲取的目的基因 能能（填“能”或“不能”）在物種之間交流；該技術(shù)還可用于對(duì)某些微量RNA病毒的檢測(cè)，可提高檢測(cè)的靈敏度，原因是 增加了待測(cè)RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測(cè)增加了待測(cè)RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測(cè)。
（3）過(guò)程②中，hLF基因插入到BLG基因之后的目的是 使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）；該過(guò)程中，兩個(gè)基因共用的調(diào)控元件是BLG基因的 啟動(dòng)子啟動(dòng)子。
（4）PEBL質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是 脂質(zhì)體介導(dǎo)脂質(zhì)體介導(dǎo)，依據(jù)的主要原理是 生物膜具有一定的流動(dòng)性生物膜具有一定的流動(dòng)性。
（5）將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng)，再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中 是否有綠色熒光是否有綠色熒光，以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。該過(guò)程 不能不能（填“能”或“不能”）區(qū)分普通質(zhì)?；蛑亟M質(zhì)粒。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄（表達(dá)）；逆（反）轉(zhuǎn)錄酶；5′；SalⅠ和BamHⅠ；能；增加了待測(cè)RNA逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的DNA的數(shù)量（或濃度），便于檢測(cè)；使人乳鐵蛋白基因在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)（或使目的基因表達(dá)）；啟動(dòng)子；脂質(zhì)體介導(dǎo)；生物膜具有一定的流動(dòng)性；是否有綠色熒光；不能
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：34引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得?；蛭膸?kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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