基因測(cè)序技術(shù)在臨床和科研中發(fā)揮著越來(lái)越重要的作用，該技術(shù)通常包括核酸提取、核酸擴(kuò)增、產(chǎn)物檢測(cè)3個(gè)步驟。
（1）已知SDS（十二烷基硫酸鈉）可以使蛋白質(zhì)變性，在利用真核生物做材料進(jìn)行DNA粗提取時(shí)，通常在研磨液中加入SDS的目的是 使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離。DNA粗提取過(guò)程中常用到體積分?jǐn)?shù)為95%的冷酒精，其作用是 分離DNA和蛋白質(zhì)分離DNA和蛋白質(zhì)。
（2）測(cè)序技術(shù)通常需要用PCR技術(shù)擴(kuò)增待測(cè)分子。如表是某研究小組設(shè)計(jì)的兩組引物，其中不合理的是 BB，原因是 引物太短、特異性弱；兩個(gè)引物會(huì)互補(bǔ)結(jié)合引物太短、特異性弱；兩個(gè)引物會(huì)互補(bǔ)結(jié)合。
| 引物 | 序列 |
| A | 5′-GCCCTCTACTCCCCGGTCTTG-3′ 5′-GCCCATCTGCAAGTTATCCTA-3′ |
| B | 5′-GGGATT-3′ 5′-AATCCC-3 |
dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導(dǎo)致復(fù)制停止，形成長(zhǎng)短不一的DNA片段
dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導(dǎo)致復(fù)制停止，形成長(zhǎng)短不一的DNA片段
。據(jù)圖分析，待測(cè)DNA片段的堿基序列是3′-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-
-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-
5′。
（4）第二代測(cè)序又稱為高通量測(cè)序。二代測(cè)序在DNA復(fù)制過(guò)程中通過(guò)捕捉新添加的堿基所攜帶的特殊標(biāo)記（一般為熒光分子標(biāo)記）來(lái)確定DNA的序列。這就要求在測(cè)序時(shí)，DNA分子必須同步復(fù)制，來(lái)增強(qiáng)熒光信號(hào)強(qiáng)度從而讀出DNA序列。據(jù)此分析，二代測(cè)序技術(shù)不適合測(cè)量較
長(zhǎng)
長(zhǎng)
（填“長(zhǎng)”或“短”）的DNA序列，原因是 DNA分子越長(zhǎng)，基因復(fù)制的同步性降低，導(dǎo)致堿基測(cè)序質(zhì)量下降
DNA分子越長(zhǎng)，基因復(fù)制的同步性降低，導(dǎo)致堿基測(cè)序質(zhì)量下降
。【考點(diǎn)】DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定．
【答案】使蛋白質(zhì)變性，與DNA分離；分離DNA和蛋白質(zhì)；B；引物太短、特異性弱；兩個(gè)引物會(huì)互補(bǔ)結(jié)合；dNTP的3'端不能形成磷酸二酯鍵導(dǎo)致復(fù)制停止，形成長(zhǎng)短不一的DNA片段；-GACTGCCA-或-TGGCAGTC-；長(zhǎng)；DNA分子越長(zhǎng)，基因復(fù)制的同步性降低，導(dǎo)致堿基測(cè)序質(zhì)量下降
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書(shū)面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：31引用：1難度：0.6
相似題
-
1．以下是有關(guān)分離與鑒別DNA的技術(shù)，其中說(shuō)法正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/15 16:30:6組卷：5引用：1難度：0.5 -
2．科研人員克隆了豬白細(xì)胞抗原基因（SLA-2基因），構(gòu)建了該基因的真核表達(dá)載體，進(jìn)行了豬腎上皮細(xì)胞表達(dá)研究。實(shí)驗(yàn)的主要流程如圖1，SLA-2基因長(zhǎng)度為1100bp,質(zhì)粒B的總長(zhǎng)度為4445bp,其限制酶切點(diǎn)后的數(shù)字表示距復(fù)制原點(diǎn)的距離。請(qǐng)回答：
（1）過(guò)程①中，PCR擴(kuò)增SLA-2的原理是限制酶 BclⅠ NotⅠ XbaⅠ San3AⅠ 識(shí)別序列及切割位點(diǎn) T↓GATCA GC↓GGCCGC T↓CTAGA ↓GATC ，下列4種引物中應(yīng)選擇的是。
a 5'-GCTCTAGAATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
b 5'-GTTGCGGCCGCTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
c 5'-GCGATCATGCGGGTCAGGGGCCCTCAAGCCATCCTC
d 5'-GTTTGATCACTCACACTCTAGGATCCTTGGTAAGGGACAC
（2）過(guò)程②將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的目的是，該過(guò)程需要用處理大腸桿菌，使其成為感受態(tài)細(xì)胞。然后將大腸桿菌涂布在含有（抗生素）的培養(yǎng)基上培養(yǎng)。
（3）若用Sau3AⅠ和XbaⅠ完全酶切質(zhì)粒C后電泳，請(qǐng)?jiān)诖痤}紙相應(yīng)位置畫(huà)出可能得到的電泳條帶。
（4）科研中常用呤霉素對(duì)真核細(xì)胞進(jìn)行篩選，一般選擇最低致死濃度的前一個(gè)濃度作為篩選濃度的原因是：既可以讓大部分沒(méi)有抗性的細(xì)胞死亡又不會(huì)讓。實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2，根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果最佳的嘌霉素篩選濃度為。
（5）過(guò)程⑦研究人員用小鼠抗SLA抗原肽單克隆抗體檢測(cè)腎上皮細(xì)胞生產(chǎn)的抗原肽，其原理是，單克隆抗體能檢測(cè)其是否具有正確的，從而是否具有生物活性。
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：41引用：3難度：0.6 -
3．下列關(guān)于“DNA片段的擴(kuò)增及電泳鑒定”的實(shí)驗(yàn)，說(shuō)法錯(cuò)誤的是（ ）
發(fā)布：2024/12/15 6:30:1組卷：3引用：1難度：0.6
把好題分享給你的好友吧~~