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腫瘤血管生長是腫瘤生長的關(guān)鍵環(huán)節(jié),血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)是一種參與促進腫瘤血管生長的蛋白質(zhì),VEGF作為治療癌癥的靶分子受到了很多研究者的關(guān)注。
(1)VEGF 的受體存在于血管內(nèi)皮細胞的
細胞膜上
細胞膜上
,可促進血管內(nèi)皮細胞的
分裂分化
分裂分化
,形成的細胞最終構(gòu)成新的血管。
(2)研究者利用噬菌體文庫篩選能與VEGF特異性結(jié)合的多肽。過程如下。
①將人工合成的編碼隨機六肽的基因插入噬菌體DNA,形成重組DNA分子,用重組DNA分子轉(zhuǎn)化大腸桿菌,大腸桿菌經(jīng)培養(yǎng)后裂解,產(chǎn)生噬菌體。這些噬菌體構(gòu)成一個文庫,一個包含所有可能六肽的噬菌體文庫至少有
206或64,000,000
206或64,000,000
種噬菌體組成,在這些噬菌體中可能有某種六肽能與VEGF特異性結(jié)合(圖一)。
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②將VEGF能夠與受體結(jié)合的部位固定在微孔容器底部,在微孔中加入隨機肽文庫,一段時間后用緩沖液洗去不能與VEGF結(jié)合的噬菌體,然后用含有
VEGF或目標分子
VEGF或目標分子
的緩沖液將結(jié)合在微孔底部的噬菌體洗脫下來,這種分子能夠與微孔容器底部的分子競爭性結(jié)合噬菌體,這說明噬菌體與目標分子的結(jié)合是
可逆
可逆
(可逆或不可逆)的。
③將洗脫下來的噬菌體轉(zhuǎn)入另一試管,加入
大腸桿菌培養(yǎng)液
大腸桿菌培養(yǎng)液
,經(jīng)過一段時間振蕩培養(yǎng),產(chǎn)生新一代噬菌體庫。
④重復(fù)步驟②③多次。
(3)在多輪實驗后產(chǎn)生的噬菌體文庫比第一代噬菌體文庫與VEGF的結(jié)合能力更強,文庫中噬菌體的種類
更少(或更單一)
更少(或更單一)
,請分析原因:
只有少數(shù)能與目標分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強的幾種噬菌體被選擇出來
只有少數(shù)能與目標分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強的幾種噬菌體被選擇出來
。
(4)欲證明篩選到的多肽X能夠起到抑制腫瘤生長的作用,研究者設(shè)計了這樣的實驗:將多肽X溶液注射到?只腫瘤模型小鼠體內(nèi),(腫瘤型鼠是天然條件下就會產(chǎn)生腫瘤的小鼠品系),檢測VEGF與VEGF受體的結(jié)合能力。請對該實驗做出評價并加以完善
該實驗方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少
該實驗方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少
。

【答案】細胞膜上;分裂分化;206或64,000,000;VEGF或目標分子;可逆;大腸桿菌培養(yǎng)液;更少(或更單一);只有少數(shù)能與目標分子結(jié)合的噬菌體才能繁殖產(chǎn)生下一代文庫,隨著傳代和選擇次數(shù)增加,競爭性結(jié)合能力最強的幾種噬菌體被選擇出來;該實驗方案存在缺陷,1、應(yīng)選擇多只各方面狀態(tài)相似的腫瘤模型小鼠,2、應(yīng)分為兩組,其中一組注射X肽,另一組注射其他六肽,3、應(yīng)檢測腫瘤大小或多少
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:31引用:2難度:0.6
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  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質(zhì)。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應(yīng)器。研究人員利用基因工程技術(shù)構(gòu)建TI基因的表達載體,并將其導(dǎo)入鹽藻細胞中,進行了一系列實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術(shù)特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關(guān)重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構(gòu)建基因表達載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構(gòu)建成功的基因表達載體應(yīng)含有的結(jié)構(gòu)有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結(jié)構(gòu)。
    (3)研究人員將TI基因?qū)胧荏w細胞后進行了檢測,相關(guān)步驟和實驗結(jié)果如表所示。該檢測方法依據(jù)的原理是
     
    。據(jù)表分析,該實驗結(jié)果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結(jié)果
    轉(zhuǎn)基因鹽藻(A組) 離心收集三組細
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    兔體內(nèi),獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測
    有雜交帶
    非轉(zhuǎn)基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
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    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
  • 3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是(  )

    發(fā)布:2024/11/3 12:0:2組卷:3引用:1難度:0.7
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