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人乳鐵蛋白(hLF)對細(xì)菌、真菌和病毒等都有抑制作用。研究人員開展人乳鐵蛋白基因乳腺特異性表達(dá)載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染研究,主要流程如圖,圖中AseⅠ、NheⅠ、SalⅠ、BamHⅠ代表相關(guān)限制酶切點,neor為新霉素抗性基因,BLG基因為β乳球蛋白基因,GFP基因為綠色熒光蛋白基因,RT-PCR為反轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng),是將RNA的反轉(zhuǎn)錄和聚合酶鏈?zhǔn)綌U(kuò)增(PCR)相結(jié)合的技術(shù)。請回答:
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(1)過程①中,不能從人肌肉細(xì)胞中提取RNA用于RT-PCR,是因為
hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá))
hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá))
hLF基因。在RT-PCR過程中,加入的引物需在5'端添加
SalⅠ和BamHⅠ
SalⅠ和BamHⅠ
兩種限制酶的識別序列,以便于hLF基因插入pEB中。
(2)過程②中,hLF基因插入到BLG基因之后的目的是使人乳鐵蛋白基因
在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)
在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá)
。過程③中,使用人工膜制成的脂質(zhì)體將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞,依據(jù)的主要原理是
生物膜具有一定的流動性
生物膜具有一定的流動性
。
(3)將轉(zhuǎn)染后的山羊乳腺上皮細(xì)胞先置于含新霉素的培養(yǎng)液中培養(yǎng),能夠存活的細(xì)胞應(yīng)該是導(dǎo)入
pEB質(zhì)?;騪EBL質(zhì)粒
pEB質(zhì)粒或pEBL質(zhì)粒
的細(xì)胞,再利用熒光顯微鏡觀察山羊乳腺上皮細(xì)胞中
是否有綠色熒光
是否有綠色熒光
,以篩選出轉(zhuǎn)染成功的細(xì)胞。
(4)要獲得轉(zhuǎn)基因山羊,還需要將成功表達(dá)hLF基因的乳腺上皮細(xì)胞的細(xì)胞核移植到山羊
去核的卵母
去核的卵母
細(xì)胞中,再借助
早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植
早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植
技術(shù)孕育出羊羔。

【答案】hLF基因在人肌肉細(xì)胞中不轉(zhuǎn)錄(表達(dá));SalⅠ和BamHⅠ;在山羊的乳腺細(xì)胞中表達(dá);生物膜具有一定的流動性;pEB質(zhì)?;騪EBL質(zhì)粒;是否有綠色熒光;去核的卵母;早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:32引用:1難度:0.6
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  • 1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7
  • 2.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
  • 3.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫中獲得?;蛭膸彀?
     
     
    。
    (2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時,解開DNA雙鏈的酶是
     
    。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時,使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是
     
    。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的
     
    。
    (3)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有
     
     
    ,其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是
     
    。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時,DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是
     

    (4)提取RNA時,提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
     

    (5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是
     

    發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6
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