如圖是A基因的部分片段和載體的部分結(jié)構(gòu),科研人員欲將A基因的啟動(dòng)子連接在圖示載體中,進(jìn)而使載體上的熒光蛋白基因得到表達(dá)。圖中標(biāo)記了A基因的部分片段、載體部分結(jié)構(gòu)中的限制酶酶切位點(diǎn)及五種限制酶的識(shí)別序列和切割位點(diǎn),回答下列問(wèn)題:

(1)A基因部分片段中R、F表示擴(kuò)增啟動(dòng)子所用的 引物引物,其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸。
(2)A基因的轉(zhuǎn)錄方向?yàn)?從左向右從左向右(填“從左向右”或“從右向左”),熒光蛋白基因的轉(zhuǎn)錄方向?yàn)?從右向左從右向左(填“從左向右”或“從右向左”),因此將A基因的啟動(dòng)子連接到載體之前應(yīng)在F的 5'5'(填“3'”或“5'”)端連接五種酶中 SalⅠSalⅠ酶的識(shí)別序列,不選擇連接X(jué)ho I酶的理由是 用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動(dòng)子獲得黏性末端時(shí)會(huì)破壞A基因的啟動(dòng)子用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動(dòng)子獲得黏性末端時(shí)會(huì)破壞A基因的啟動(dòng)子。
(3)為完成科研人員的設(shè)想,除需使用F處添加的序列所對(duì)應(yīng)的酶外,構(gòu)建和擴(kuò)增基因表達(dá)載體的過(guò)程還需用到 55種酶,分別是 EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合;DNA片段的擴(kuò)增與電泳鑒定.
【答案】引物;使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開(kāi)始連接脫氧核苷酸;從左向右;從右向左;5';SalⅠ;用XhoⅠ切割A(yù)基因啟動(dòng)子獲得黏性末端時(shí)會(huì)破壞A基因的啟動(dòng)子;5;EcoRⅠ、MunⅠ、XhoⅠ、TaqDNA聚合酶(耐高溫的DNA聚合酶)、DNA連接酶
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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