當前位置： 2020-2021學年江蘇省南通市如東縣高二（上）期末生物試卷> 試題詳情

近年來，科學家利用基因工程技術創(chuàng)造出許多優(yōu)良品種或產品。如圖為獲得抗除草劑轉基因玉米的技術路線，其中含有內含子的報告基因只能在真核生物中正確表達，其產物能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色。請回答以下問題：

（1）獲得抗除草劑轉基因玉米的過程中核心步驟是
基因表達載體構建
基因表達載體構建
。
（2）為防止酶切產物自身環(huán)化，需使用
2
2
種限制酶，分別對含除草劑抗性基因G的DNA片段和Ti-質粒上的
T-DNA
T-DNA
（填“報告基因”、“T-DNA”、“氨芐青霉素抗性基因”）進行酶切。
（3）為提高轉化成功率，常用含
Ca²⁺
Ca²⁺
的溶液處理土壤農桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。轉化成功的農桿菌應在含
氨芐青霉素
氨芐青霉素
的培養(yǎng)基上進行篩選1。
（4）農桿菌細胞內“報告基因”表達后
不能
不能
（填“能”或“不能”）能催化無色物質K呈現(xiàn)藍色，原因是
報告基因中的內含子轉錄產生的RNA序列在農桿菌中不能被切除，導致農桿菌內“報告基因”翻譯的蛋白質結構不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質K呈現(xiàn)藍色
報告基因中的內含子轉錄產生的RNA序列在農桿菌中不能被切除，導致農桿菌內“報告基因”翻譯的蛋白質結構不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質K呈現(xiàn)藍色
。
（5）農桿菌轉化愈傷組織的過程中，愈傷組織表面常殘留農桿菌，會導致未轉化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。所以進行過程篩選2時，應在培養(yǎng)基中加入
除草劑和物質K
除草劑和物質K
，并挑選
愈傷組織細胞內呈顯藍色
愈傷組織細胞內呈顯藍色
的植物細胞，進行
植物組織培養(yǎng)
植物組織培養(yǎng)
獲得抗除草劑轉基因玉米幼苗。

【答案】基因表達載體構建；2；T-DNA；Ca²⁺；氨芐青霉素；不能；報告基因中的內含子轉錄產生的RNA序列在農桿菌中不能被切除，導致農桿菌內“報告基因”翻譯的蛋白質結構不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質K呈現(xiàn)藍色；除草劑和物質K；愈傷組織細胞內呈顯藍色；植物組織培養(yǎng)

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：4難度：0.7

相似題

1．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細胞內提取mRNA經逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列

B．擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進行子鏈合成

C．導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞

D．利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

2．經由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)模化生產重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
（1）通過上述基因工程技術獲取目標產物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a目標蛋白
④目的基因導入受體細胞
⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
（2）在PCR過程中，引物的功能是

。
A．啟動DNA復制
B．規(guī)定擴增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當復制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
D．將Ap抗性克隆轉移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
解析
3．用限制酶EcoRⅤ單獨切割某普通質粒，可產生14kb（1kb即1000個堿基對）的長鏈，而同時用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質粒，可得到三種長度的DNA片段，見圖（其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個黏性末端）。

若用MboⅠ限制酶單獨切割該普通質粒，則產生的DNA片段的長度為（　?。?/h2>
A．2.5和5.5 B．2.5和6 C．5.5和8 D．6和8
發(fā)布：2024/11/14 4:0:2組卷：89引用：9難度：0.7
解析

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1．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />

1．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />