近年來，科學家利用基因工程技術創(chuàng)造出許多優(yōu)良品種或產(chǎn)品。如圖為獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的技術路線，其中含有內(nèi)含子的報告基因只能在真核生物中正確表達，其產(chǎn)物能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。請回答以下問題：
（1）獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米的過程中核心步驟是基因表達載體構(gòu)建基因表達載體構(gòu)建。
（2）為防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化，需使用22種限制酶，分別對含除草劑抗性基因G的DNA片段和Ti-質(zhì)粒上的T-DNAT-DNA（填“報告基因”、“T-DNA”、“氨芐青霉素抗性基因”） 進行酶切。
（3）為提高轉(zhuǎn)化成功率，常用含Ca2+Ca2+的溶液處理土壤農(nóng)桿菌，使其成為感受態(tài)細胞。轉(zhuǎn)化成功的農(nóng)桿菌應在含氨芐青霉素氨芐青霉素的培養(yǎng)基上進行篩選1。
（4）農(nóng)桿菌細胞內(nèi)“報告基因”表達后不能不能（填“能”或“不能”）能催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色，原因是報告基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA序列在農(nóng)桿菌中不能被切除，導致農(nóng)桿菌內(nèi)“報告基因”翻譯的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色報告基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA序列在農(nóng)桿菌中不能被切除，導致農(nóng)桿菌內(nèi)“報告基因”翻譯的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色。
（5）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化愈傷組織的過程中，愈傷組織表面常殘留農(nóng)桿菌，會導致未轉(zhuǎn)化的愈傷組織可能在含除草劑的培養(yǎng)基中生長。所以進行過程篩選2時，應在培養(yǎng)基中加入除草劑和物質(zhì)K除草劑和物質(zhì)K，并挑選愈傷組織細胞內(nèi)呈顯藍色愈傷組織細胞內(nèi)呈顯藍色的植物細胞，進行植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)獲得抗除草劑轉(zhuǎn)基因玉米幼苗。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體構(gòu)建；2；T-DNA；Ca2+；氨芐青霉素；不能；報告基因中的內(nèi)含子轉(zhuǎn)錄產(chǎn)生的RNA序列在農(nóng)桿菌中不能被切除，導致農(nóng)桿菌內(nèi)“報告基因”翻譯的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)不同，不具相應的酶活性，無法催化無色物質(zhì)K呈現(xiàn)藍色；除草劑和物質(zhì)K；愈傷組織細胞內(nèi)呈顯藍色；植物組織培養(yǎng)
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：4難度：0.7
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1．下列有關基因工程技術和蛋白質(zhì)工程技術敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內(nèi)的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6 -
3．下列有關基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7