圖1表示CRISPR/Cas9基因編輯的主要作用機理，通過對靶基因的剪切和DNA自我修復可實現(xiàn)靶基因的定點突變。圖2是FANCM基因結構示意圖，F(xiàn)ANCM蛋白能阻止減數(shù)分裂過程中交叉互換的發(fā)生。科研人員通過構建CRISPR/Cas9重組表達載體，以生菜嫩葉作外植體，經(jīng)農桿菌轉化，培育出FANCM基因的突變純合新品種。請回答下列問題：
（1）組成FANCM基因外顯子和內含子的基本組成單位是 脫氧核苷酸脫氧核苷酸。根據(jù)圖2靶序列設計的gRNA中相應序列是5′-UUGUAUACCAUGAGCUGAAAGG-UUGUAUACCAUGAGCUGAAAGG--3′。
（2）構建 CRISPR/Cas9重組表達載體時主要利用的工具酶有 DNA連接酶和限制酶DNA連接酶和限制酶。研究中需要將gRNA和Cas9基因序列均插入到Ti質粒的T-DNA內部，其目的是 T-DNA可以插入到受體細胞T-DNA可以插入到受體細胞。
（3）科研人員將 CRISPR/Cas9重組表達載體導入農桿菌時，為提高導入成功率，常利用CaCl2處理農桿菌，其目的是 使農桿菌成為感受態(tài)，易于接受環(huán)境中的DNA分子使農桿菌成為感受態(tài)，易于接受環(huán)境中的DNA分子。將轉化的農桿菌接種到液體培養(yǎng)基中，在220r?min-1、28℃條件下?lián)u床培養(yǎng)10～12h,其目的是 使農桿菌恢復常態(tài)，易于大量培養(yǎng)增殖使農桿菌恢復常態(tài)，易于大量培養(yǎng)增殖。
（4）科研人員通過對生菜細胞中FANCM基因測序確定突變株，如表是野生型生菜和實驗獲得的生菜植株（T0）的相關測序結果。
| 野生型生菜 | 5′-AAAGCTCCTTTCAGCTCATGGTATACAACCAGCATTTGAT-3′ |
| T0植株 | 5′-AAAGCTCCTTTCAGCTCATGGTATACAACCAGCATTTGAT-3′ |
| 5′-AAAGCTCCTTTCATCATGGTATACAACCAGCATTTGAT-3′ |
缺失
缺失
。若T.植株連續(xù)自交兩代，則F2中突變純合體占比為 3
8
3
8
②獲得的FANCM基因突變純合體在遺傳育種中的應用價值是
增加雜交育種過程中基因重組的頻率，產生更多新品種，加速生菜育種進程
增加雜交育種過程中基因重組的頻率，產生更多新品種，加速生菜育種進程
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】脫氧核苷酸；UUGUAUACCAUGAGCUGAAAGG-；DNA連接酶和限制酶；T-DNA可以插入到受體細胞；使農桿菌成為感受態(tài)，易于接受環(huán)境中的DNA分子；使農桿菌恢復常態(tài)，易于大量培養(yǎng)增殖；缺失；；增加雜交育種過程中基因重組的頻率，產生更多新品種，加速生菜育種進程
3
8
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：44引用：2難度：0.6
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2．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
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