蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，可制成防彈背心、降落傘繩等。蜘蛛絲還可被制成人造韌帶和人造肌腱。科學(xué)家研究出集中生產(chǎn)蜘蛛絲的方法，培育轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊。目前，基因工程中使用的限制酶主要是從原核生物中分離純化獲得的。含有限制酶的細(xì)胞通常還具有相應(yīng)的甲基化酶，它可對(duì)自身DNA進(jìn)行甲基化修飾。請(qǐng)根據(jù)資料和圖解回答下列問(wèn)題：

（1）原核細(xì)胞中的限制酶可切割外源DNA，但不破壞自身DNA，其原因可能是
①

細(xì)胞自身的DNA分子沒(méi)有該限制酶的識(shí)別序列

細(xì)胞自身的DNA分子沒(méi)有該限制酶的識(shí)別序列

；
②

甲基化酶對(duì)細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化修飾，限制酶無(wú)法識(shí)別修飾后的DNA序列

甲基化酶對(duì)細(xì)胞自身的DNA進(jìn)行甲基化修飾，限制酶無(wú)法識(shí)別修飾后的DNA序列

。
（2）如圖為蛛絲蛋白基因?qū)?yīng)的DNA片段結(jié)構(gòu)示意圖。

則與之對(duì)應(yīng)的引物結(jié)合部位應(yīng)該是圖中的

2、3

2、3

（填數(shù)字）；PCR過(guò)程中，若一個(gè)蛛絲蛋白基因擴(kuò)增了4次，則消耗了引物

14

14

個(gè)，所得DNA中含有其中一種引物的共

6

6

個(gè)。
（3）若想在蜘蛛羊乳汁中提取所需要的蛛絲蛋白，可以通過(guò)①過(guò)程將蛛絲蛋白基因和乳腺中

特異表達(dá)

特異表達(dá)

的基因的

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

等調(diào)控元件重組在一起，該調(diào)控元件上有

RNA聚合

RNA聚合

酶結(jié)合位點(diǎn)。通過(guò)

顯微注射法

顯微注射法

的方法導(dǎo)入山羊的

受精卵

受精卵

中培育成蜘蛛羊，這樣就可以在蜘蛛羊的乳汁中提取蛛絲蛋白，這稱為

乳腺生物反應(yīng)器

乳腺生物反應(yīng)器

。
（4）目的基因?qū)胧荏w后，進(jìn)行了PCR檢測(cè)結(jié)果如圖（1號(hào)來(lái)自普通山羊，2號(hào)是含蛛絲蛋白基因的質(zhì)粒，3～8號(hào)來(lái)自轉(zhuǎn)基因山羊），從結(jié)果可以看出，

3、5、8

3、5、8

號(hào)山羊含有蛛絲蛋白基因。若這些成功導(dǎo)入目的基因的轉(zhuǎn)基因蜘蛛羊并沒(méi)有產(chǎn)生相應(yīng)的蛛絲蛋白，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是

蛛絲蛋白基因沒(méi)有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒(méi)有翻譯

蛛絲蛋白基因沒(méi)有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒(méi)有翻譯

。