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科研人員通過敲除里氏木霉基因組中去乙?;富颍℉DAC),探究組蛋白乙?;瘜w維素酶基因表達(dá)的影響,其主要過程如圖1。請據(jù)圖回答問題。

(1)PCR反應(yīng)體系中,除加入引物和模板DNA外,一般還需要加入
Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等
Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等
。在最后一個循環(huán)結(jié)束后通常還需要維持72℃7min,其目的是
使子鏈充分延伸(或充分反應(yīng),獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段)
使子鏈充分延伸(或充分反應(yīng),獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段)
。
(2)引物設(shè)計是PCR的關(guān)鍵,本研究中引物R1的5'端添加與引物Fc互補(bǔ)的序列,其目的是
便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因)
便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因)
。在PCR5中加入的引物是
R2和FG
R2和FG

(3)在原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化過程中,加入適量的CaCl2和PEG溶液,其目的是
促進(jìn)外源DNA分子進(jìn)入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài))
促進(jìn)外源DNA分子進(jìn)入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài))
。涂布時,涂布器用
灼燒滅菌(或酒精引燃)
灼燒滅菌(或酒精引燃)
法滅菌后將原生質(zhì)體接種到含
新霉素
新霉素
的固體培養(yǎng)基上篩選。
(4)為探究敲除基因HDAG后對纖維素酶基因(CBHI、EGLI)和纖維素酶基因激活因子基因XYR1轉(zhuǎn)錄的影響,研究中先提取
(培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細(xì)胞的總RNA(或總RNA)
(培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細(xì)胞的總RNA(或總RNA)
,再利用熒光RT-PCR技術(shù)檢測,結(jié)果如圖2。依據(jù)結(jié)果可以得出的結(jié)論是
敲除基因HDAC使細(xì)胞中組蛋白去乙?;溉狈Γ?xì)胞中組蛋白乙?;潭雀?,可以顯著提高纖維素酶基因的表達(dá)
敲除基因HDAC使細(xì)胞中組蛋白去乙酰化酶缺乏,細(xì)胞中組蛋白乙?;潭雀?,可以顯著提高纖維素酶基因的表達(dá)

【答案】Taq酶、dNTP(緩沖液、Mg2+)等;使子鏈充分延伸(或充分反應(yīng),獲得更多的完整目的片段,或獲得更多的完整目的片段);便于H1和GR拼接(便于PCR4時形成H1-GR融合基因);R2和FG;促進(jìn)外源DNA分子進(jìn)入原生質(zhì)體(或使原生質(zhì)體變成感受態(tài));灼燒滅菌(或酒精引燃);新霉素;(培養(yǎng)到第5天的)兩類菌株細(xì)胞的總RNA(或總RNA);敲除基因HDAC使細(xì)胞中組蛋白去乙?;溉狈?,細(xì)胞中組蛋白乙酰化程度高,可以顯著提高纖維素酶基因的表達(dá)
【解答】
【點(diǎn)評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:28引用:2難度:0.7
相似題
  • 1.科學(xué)家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力,利用PCR定點(diǎn)突變技術(shù)改造Rubisco酶基因,從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題:
    (1)PCR定點(diǎn)突變技術(shù)屬于
     
    (填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”)??衫枚c(diǎn)突變的DNA構(gòu)建基因表達(dá)載體,常用
     
    將基因表達(dá)載體導(dǎo)入植物細(xì)胞,還需用到植物細(xì)胞工程中的
     
    技術(shù),才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
    (2)PCR過程所依據(jù)的原理是
     
    。利用PCR技術(shù)擴(kuò)增,若將一個目的基因復(fù)制10次,則需要在緩沖液中至少加入
     
    個引物。
    (3)目的基因進(jìn)入受體細(xì)胞內(nèi),并在受體細(xì)胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達(dá)的過程稱為
     
    ??蒲腥藛T通過實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大,可能的原因是
     

    (4)另有一些科學(xué)家利用生物技術(shù)將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募?xì)胞核中,經(jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠,其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關(guān)敘述錯誤的是
     

    A.選擇受精卵作為外源基因的受體細(xì)胞是因?yàn)檫@種細(xì)胞的全能性最容易表達(dá)
    B.采用DNA分子雜交技術(shù)可檢測外源基因在小鼠細(xì)胞內(nèi)是否成功表達(dá)
    C.人的生長激素基因能在小鼠細(xì)胞表達(dá),說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
    D.將轉(zhuǎn)基因小鼠體細(xì)胞進(jìn)行核移植(克?。?,可以獲得多個具有外源基因的后代

    發(fā)布:2025/1/16 8:0:1組卷:14引用:2難度:0.6
  • 2.數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù),其原理如圖所示。下列有關(guān)敘述正確的是( ?。?img alt src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:6引用:2難度:0.6
  • 3.下列關(guān)于DNA片段擴(kuò)增及其鑒定的說法錯誤的是(  )

    發(fā)布:2024/12/30 23:30:2組卷:3引用:3難度:0.7
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