基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?;ㄒ蛉狈λ{(lán)色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開(kāi)藍(lán)色花,因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細(xì)胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中,以期獲得藍(lán)色矮牽牛新品種,該過(guò)程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為G↓GATCC、↓GATC、A↓AGCTT。
請(qǐng)回答下列問(wèn)題:
(1)質(zhì)粒是獨(dú)立于 真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核之外,具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子,圖1質(zhì)粒中沒(méi)有顯示的結(jié)構(gòu)是 復(fù)制原點(diǎn)復(fù)制原點(diǎn),啟動(dòng)子的功能是 啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位。
(2)若用只用HindⅢ切割含目的基因的DNA片段,有可能會(huì)帶來(lái)的不良影響是 自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接。在用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),最好選用 HindⅢ和Sau3AⅠHindⅢ和Sau3AⅠ限制酶來(lái)切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段,理由是 質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合。
(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌,最終成功導(dǎo)入藍(lán)色素基因的農(nóng)桿菌,在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是 能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合.
【答案】真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核;復(fù)制原點(diǎn);啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位;自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接;HindⅢ和Sau3AⅠ;質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合;能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:1難度:0.6
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