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基因工程是新品種花卉培育中的一種重要技術(shù)手段。研究發(fā)現(xiàn)普通矮牽?;ㄒ蛉狈λ{(lán)色色素合成所需的轉(zhuǎn)座酶而不能開藍(lán)色花,因此研究人員嘗試將從薔薇花瓣細(xì)胞中分離提取的轉(zhuǎn)座酶F35H基因轉(zhuǎn)入普通的矮牽牛中,以期獲得藍(lán)色矮牽牛新品種,該過程所用的質(zhì)粒與含轉(zhuǎn)座酶F35H基因的DNA片段上相關(guān)限制酶的酶切位點(diǎn)分別如圖1、圖2所示。限制性內(nèi)切核酸酶BamHⅠ、Sau3AⅠ、HindⅢ識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為GGATCC、GATC、AAGCTT。
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請(qǐng)回答下列問題:
(1)質(zhì)粒是獨(dú)立于
真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核
真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核
之外,具有自我復(fù)制能力的環(huán)狀雙鏈DNA分子,圖1質(zhì)粒中沒有顯示的結(jié)構(gòu)是
復(fù)制原點(diǎn)
復(fù)制原點(diǎn)
,啟動(dòng)子的功能是
啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位
啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位
。
(2)若用只用HindⅢ切割含目的基因的DNA片段,有可能會(huì)帶來的不良影響是
自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接
自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接
。在用圖中質(zhì)粒和轉(zhuǎn)座酶F35H基因構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí),最好選用
HindⅢ和Sau3AⅠ
HindⅢ和Sau3AⅠ
限制酶來切割質(zhì)粒和含目的基因的DNA片段,理由是
質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合
質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合
。
(3)將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)入土壤農(nóng)桿菌,最終成功導(dǎo)入藍(lán)色素基因的農(nóng)桿菌,在含氨芐青霉素培養(yǎng)基、含四環(huán)素培養(yǎng)基、同時(shí)含氨芐青霉素和四環(huán)素的培養(yǎng)基上的生存狀況應(yīng)該是
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
。

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合
【答案】真核細(xì)胞的細(xì)胞核或原核細(xì)胞擬核;復(fù)制原點(diǎn);啟動(dòng)轉(zhuǎn)錄,是RNA聚合酶結(jié)合的部位;自身環(huán)化,不利于與質(zhì)粒連接;目的基因與質(zhì)粒反向連接;HindⅢ和Sau3AⅠ;質(zhì)粒和目的基因都有這兩種限制酶識(shí)別位點(diǎn),并且切割后產(chǎn)生的黏性末端不同,不會(huì)出現(xiàn)自身環(huán)化現(xiàn)象,有利于質(zhì)粒和目的基因結(jié)合;能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時(shí)含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:14引用:1難度:0.6
相似題
  • 1.基因工程在農(nóng)牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應(yīng)用發(fā)展迅速,如圖表示利用基因工程技術(shù)生產(chǎn)人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯(cuò)誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 2.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會(huì)引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應(yīng),嚴(yán)重時(shí)甚至危及生命,因此必須對(duì)食品中生物胺的含量進(jìn)行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實(shí)現(xiàn)了高效表達(dá)。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標(biāo)產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號(hào))。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細(xì)胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)模化生產(chǎn)目標(biāo)蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞
    ⑤目的基因和運(yùn)載體重組構(gòu)建表達(dá)載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     

    A.啟動(dòng)DNA復(fù)制
    B.規(guī)定擴(kuò)增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當(dāng)復(fù)制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設(shè)計(jì)的PCR引物應(yīng)為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導(dǎo)入受體細(xì)胞。載體的化學(xué)本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴(kuò)增反應(yīng)中,溫度隨時(shí)間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實(shí)驗(yàn)操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     
    。
    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進(jìn)行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進(jìn)行PCR檢測(cè)
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
  • 3.用限制酶EcoRⅤ單獨(dú)切割某普通質(zhì)粒,可產(chǎn)生14kb(1kb即1000個(gè)堿基對(duì))的長鏈,而同時(shí)用限制酶EcoRⅤ、MboⅠ聯(lián)合切割該質(zhì)粒,可得到三種長度的DNA片段,見圖(其中*表示EcoRⅤ限制酶切割后的一個(gè)黏性末端)。
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    若用MboⅠ限制酶單獨(dú)切割該普通質(zhì)粒,則產(chǎn)生的DNA片段的長度為( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/14 4:0:2組卷:89引用:9難度:0.7
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