生態(tài)文明建設(shè)已成為我國(guó)的基本國(guó)策。水中雌激素類物質(zhì)（E物質(zhì)）污染會(huì)導(dǎo)致魚(yú)類雌性化等異常，并通過(guò)食物鏈影響人體健康和生態(tài)安全。原產(chǎn)南亞的斑馬魚(yú)，其肌細(xì)胞、生殖細(xì)胞等存在E物質(zhì)受體，且幼體透明?？茖W(xué)家將綠色熒光蛋白（GFP）等基因轉(zhuǎn)入斑馬魚(yú)，建立了一種經(jīng)濟(jì)且快速的水體E物質(zhì)監(jiān)測(cè)方法。
（1）將表達(dá)載體導(dǎo)入斑馬魚(yú)受精卵的最佳方式是

顯微注射

顯微注射

。
（2）為監(jiān)測(cè)E物質(zhì)，研究者設(shè)計(jì)了如圖所示的兩種方案制備轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)，其中ERE和酵母來(lái)源的UAS是兩種誘導(dǎo)型啟動(dòng)子，分別被E物質(zhì)-受體復(fù)合物和酵母來(lái)源的Gal4蛋白特異性激活，啟動(dòng)下游基因表達(dá)。

與方案1相比，方案2的主要優(yōu)勢(shì)是

監(jiān)測(cè)靈敏度更高

監(jiān)測(cè)靈敏度更高

，因而被用于制備監(jiān)測(cè)魚(yú)（MO）。
現(xiàn)擬制備一種不育的監(jiān)測(cè)魚(yú)SM，用于實(shí)際監(jiān)測(cè)。SM需經(jīng)MO和另一親本（X）雜交獲得。欲獲得X，需從以下選項(xiàng)中選擇啟動(dòng)子和基因，構(gòu)建表達(dá)載體并轉(zhuǎn)入野生型斑馬魚(yú)受精卵，經(jīng)培育后進(jìn)行篩選。請(qǐng)將選項(xiàng)的序號(hào)填入相應(yīng)的方框中。
Ⅰ．啟動(dòng)子：

①

①

。
①UAS
②ERE
③使基因僅在肌細(xì)胞表達(dá)的啟動(dòng)子（P?。?br />④使基因僅在生殖細(xì)胞表達(dá)的啟動(dòng)子（P生）
Ⅱ．基因：

C

C

。
A．Gal4
B．GFP
C．僅導(dǎo)致生殖細(xì)胞凋亡的基因（dg）
D．雌激素受體基因（ER）
（3）SM不育的原因是：成體SM自身產(chǎn)生雌激素，與受體結(jié)合后

激活ERE誘導(dǎo)Gal4表達(dá)，Gal4結(jié)合UAS誘導(dǎo)dg表達(dá)，生殖細(xì)胞凋亡

激活ERE誘導(dǎo)Gal4表達(dá)，Gal4結(jié)合UAS誘導(dǎo)dg表達(dá)，生殖細(xì)胞凋亡

造成不育。
（4）使擬用于實(shí)際監(jiān)測(cè)的SM不育的目的是

避免轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)逃逸帶來(lái)生物安全問(wèn)題

避免轉(zhuǎn)基因斑馬魚(yú)逃逸帶來(lái)生物安全問(wèn)題

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