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菁優(yōu)網(wǎng)回答下列有關(guān)遺傳信息傳遞與表達的問題.
pIJ702是一種常用質(zhì)粒(如圖),其中tsr為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因,mel是黑色素合成基因,其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而限制酶ClaⅠ、BglⅡ、PstⅠ、SacⅠ、SphⅠ在pIJ702上分別只有一處識別序列.
(1)質(zhì)粒DNA分子中的兩條鏈靠
鍵維系成雙鏈結(jié)構(gòu).
(2)以SacⅠ和SphⅠ切取的目的基因置換pIJ702上0.4kb(1kb=1000對堿基)的SacⅠ/SphⅠ片段,構(gòu)成重組質(zhì)粒pZHZ8.上述兩種質(zhì)粒的限制酶酶切片段長度列在表1中.由此判斷目的基因內(nèi)部是否含有BglⅡ切割位點,并說明判斷依據(jù)
含有,據(jù)表4和題意,pIJ702上原有的一個BglⅡ位點被目的基因置換后,pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀,故目的基因中必然含有一個BglⅡ位點.
含有,據(jù)表4和題意,pIJ702上原有的一個BglⅡ位點被目的基因置換后,pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀,故目的基因中必然含有一個BglⅡ位點.

(3)已知pIJ702上含mel基因的ClaⅠ/PstⅠ區(qū)域長度為2.5kb,若用ClaⅠ和PstⅠ聯(lián)合酶切pZHZ8,則參照表1數(shù)據(jù)可斷定酶切產(chǎn)物中最小片段的長度為
0.3
0.3
kb.
表1
 pIJ702pZHZ8
BglⅡ5.7kb6.7kb
ClaⅠ5.7kb2.2kb,4.5kb
PstⅠ5.7kb1.6kb,5.1kb
(3)不含質(zhì)粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素固體培養(yǎng)基上的生長狀況如表2所示.若要篩選接納了pIJ702或pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需的硫鏈絲菌素最小濃度應為
5
5
μg/mL(填寫表格中給定濃度);含有重組質(zhì)粒pZHZ8的菌落呈
色.
表2
固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(μg/mL)012510
不含質(zhì)粒的鏈霉菌生長狀況+++++++++--
“+”表示生長;“-”表示不長
(4)上述目的基因來源于原核生物,其蛋白質(zhì)編碼序列(即編碼從起始密碼子到終止密碼子之間的序列)經(jīng)測定為1256對堿基,試判斷對這段序列的測定是否存在錯誤:
錯誤
錯誤
,并說明依據(jù)
因為原核生物決定每個氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼,所以基因的編碼堿基序列應為3的整數(shù)倍
因為原核生物決定每個氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼,所以基因的編碼堿基序列應為3的整數(shù)倍

【答案】氫;含有,據(jù)表4和題意,pIJ702上原有的一個BglⅡ位點被目的基因置換后,pZHZ8仍被BglⅡ切為線狀,故目的基因中必然含有一個BglⅡ位點.;0.3;5;白;錯誤;因為原核生物決定每個氨基酸的堿基序列為三聯(lián)密碼,所以基因的編碼堿基序列應為3的整數(shù)倍
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:644引用:6難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/16 21:0:1組卷:36引用:2難度:0.5
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    發(fā)布:2024/11/14 7:0:1組卷:62引用:7難度:0.7
  • 3.經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應,嚴重時甚至危及生命,因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶(MCO)能高效分解生物胺,基于基因工程規(guī)模化生產(chǎn)重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術(shù)獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因,然后轉(zhuǎn)入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
    (1)通過上述基因工程技術(shù)獲取目標產(chǎn)物,涉及如下步驟,則合理的操作步驟排序是
     
    (填寫下列編號)。
    ①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
    ②選用合適的方法獲取目的基因
    ③借助發(fā)酵工程規(guī)?;a(chǎn)目標蛋白
    ④目的基因?qū)胧荏w細胞
    ⑤目的基因和運載體重組構(gòu)建表達載體
    (2)在PCR過程中,引物的功能是
     
    。
    A.啟動DNA復制
    B.規(guī)定擴增區(qū)間
    C.解旋DNA雙鏈
    D.充當復制模板
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    (3)為獲得目的基因MCO(圖甲灰色表示的序列),正確設計的PCR引物應為圖甲中的
     
    。
    (4)獲取目的基因后,需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質(zhì)是
     
    (填DNA或RNA/DNA或RNA)。
    (5)在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中,溫度隨時間的變化順序是圖乙中的
     
    。
    (6)若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端,那么載體質(zhì)粒pCLY15(圖丙中圖1)需用
     
     
    切開,才能與MCO片段高效連接。
    (7)下列實驗操作中,能有效鑒別載體質(zhì)粒pCLY15空載還是“滿載”的是
     

    A.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,用合適的限制酶切割
    B.在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑,以克隆的顏色進行鑒別
    C.從抗藥性克隆中提取質(zhì)粒DNA,以此為模板進行PCR檢測
    D.將Ap抗性克隆轉(zhuǎn)移至含Tc(四環(huán)素)的平板上,根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別

    發(fā)布:2024/11/14 4:30:2組卷:29引用:3難度:0.5
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