藍細菌中的ictB蛋白能高效轉(zhuǎn)運和濃縮CO2從而提高細胞光合速率，我國科學(xué)家構(gòu)建了葉片特異性啟動子Cab（葉綠體捕光色素蛋白Cab基因啟動子）驅(qū)動的藍細菌ictB基因表達載體，并通過農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法獲得了轉(zhuǎn)ictB基因水稻，大大提高了水稻的產(chǎn)量。在ictB基因載體的構(gòu)建中，含Cab啟動子和ictB基因的重組DNA分子和Ti質(zhì)粒的酶切位點如圖1所示。請回答下列問題：
（1）為使重組DNA分子能定向插入T-DNA中，可用PCR的方法在重組DNA分子兩端添加限制酶識別序列，據(jù)圖可知，M端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是 BglⅠBglⅠ，N端添加的序列所對應(yīng)的限制酶是 EcoRVEcoRV。經(jīng)過酶切的重組DNA分子和Ti質(zhì)粒進行連接時，可選用 DNA連接酶DNA連接酶（填“E.coli DNA連接酶”或“DNA連接酶”）。添加了限制酶識別序列的重組DNA分子與Ti質(zhì)粒的重組過程共需要 44種酶。
（2）將農(nóng)桿菌液浸泡過的水稻愈傷組織進行植物組織培養(yǎng)，培養(yǎng)基中需加入 潮霉素潮霉素進行篩選，最終獲得多個水稻株系a1、a2、a3、a1。對a1～a1四個水稻株系的ictB蛋白表達量進行測定，結(jié)果如圖2，其中a4株系ictB蛋白表達量較低的原因可能是 a4水稻株系中目的基因未表達a4水稻株系中目的基因未表達，檢測應(yīng)選用的植物器官是 葉片葉片，原因是 Cab啟動子是葉片特異性啟動子，它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達Cab啟動子是葉片特異性啟動子，它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達。
【考點】植物的組織培養(yǎng)．
【答案】BglⅠ；EcoRV；DNA連接酶；4；潮霉素；a4水稻株系中目的基因未表達；葉片；Cab啟動子是葉片特異性啟動子，它使ictB基因只能選擇性的在葉片中表達
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/11/24 17:0:1組卷：10引用：2難度：0.7
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