研究發(fā)現(xiàn)物質(zhì)M與肝細(xì)胞膜上R蛋白結(jié)合可促進(jìn)某動(dòng)物肝臟細(xì)胞的增殖,設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證該發(fā)現(xiàn)。實(shí)驗(yàn)材料與用具:正常肝臟細(xì)胞、R蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞(R蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞增殖能力有所降低)、M物質(zhì)溶液、培養(yǎng)液、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡及其他用具)。
(說明:不考慮加入M后的體積變化,M與R蛋白不結(jié)合時(shí)對細(xì)胞無影響。所有肝臟細(xì)胞均具有分裂能力,只進(jìn)行原代培養(yǎng)。)
(1)實(shí)驗(yàn)思路:取培養(yǎng)瓶若干個(gè),分組并編號如下:
A、C組:等量適量的細(xì)胞培養(yǎng)液+等量適量的正常肝臟細(xì)胞
B、D組;等量的細(xì)胞培養(yǎng)液+R蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞R蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞
①各組樣品在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng),每隔6小時(shí)各取其中的幾個(gè)樣品,用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)并記錄。
②培養(yǎng)12小時(shí)后,在A、B兩組中分別加入等量適量的 M物質(zhì)溶液M物質(zhì)溶液。
③重復(fù)步驟①
④24小時(shí)后結(jié)束實(shí)驗(yàn),統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)。
(2)請用曲線圖預(yù)測實(shí)驗(yàn)結(jié)果(要求:注明加入物質(zhì)M的時(shí)間) 。
(3)分析討論:
①由于動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)貼壁生長難以形成細(xì)胞懸液,所以需加入 胰蛋白酶胰蛋白酶,并搖勻后再測定相關(guān)數(shù)據(jù)。
②物質(zhì)M能與R蛋白特異性結(jié)合,與R蛋白的 空間結(jié)構(gòu)空間結(jié)構(gòu)有關(guān)。
③M物質(zhì)發(fā)揮作用的過程 能能(填“能”或“不能”)體現(xiàn)細(xì)胞膜的選擇透過性。
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過程.
【答案】R蛋白基因敲除的肝臟細(xì)胞;用血細(xì)胞計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù);M物質(zhì)溶液;;胰蛋白酶;空間結(jié)構(gòu);能
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:2難度:0.7
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發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:29引用:2難度:0.7 -
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A.胰島素
B.胰島素mRNA
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