實(shí)驗(yàn)小組將啟動(dòng)子rd29A和擬南芥植株的抗寒基因DREBI相連后導(dǎo)入大豆，獲得了抗寒轉(zhuǎn)基因植株，圖1表示構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)所用的載體，已知Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ為四種不同的限制酶，其各自識別的DNA序列如表所示?；卮鹣铝袉栴}：

限制酶	Ⅰ	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ
識別序列及切割位點(diǎn)	↓GGATCC CCTAGG↑	↓TGTACA ACATGT↑	↓GTAC CATG↑	↓AAGCTT TTCGAA↑

（1）構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中最好同時(shí)使用

Ⅱ、Ⅳ

Ⅱ、Ⅳ

兩種限制酶切割質(zhì)粒，原因是

同時(shí)使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標(biāo)記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同

同時(shí)使用兩種限制酶可產(chǎn)生不同的黏性末端，使目的基因和質(zhì)粒定向連接，酶Ⅰ破壞了標(biāo)記基因，酶Ⅱ和酶Ⅲ切割出的黏性末端相同

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（2）欲將重組質(zhì)粒導(dǎo)入大豆的愈傷組織細(xì)胞中，一般使用

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化

法導(dǎo)入。培養(yǎng)基中需要加入

四環(huán)素

四環(huán)素

（填“四環(huán)素”或“氨芐青霉素”），其作用是

對含目的基因的組織細(xì)胞進(jìn)行篩選

對含目的基因的組織細(xì)胞進(jìn)行篩選

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（3）實(shí)驗(yàn)小組進(jìn)一步研究了不同的溫度誘導(dǎo)下轉(zhuǎn)基因植株中抗寒基因DREBI的表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖2所示，從分子水平上檢測轉(zhuǎn)基因大豆中DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物，可采用的方法是

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

。試根據(jù)檢測結(jié)果闡述目的植株導(dǎo)入DREBI基因的優(yōu)點(diǎn)在于

隨著溫度的降低，DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達(dá)，避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)

隨著溫度的降低，DREBI基因的表達(dá)產(chǎn)物有利于植物抵抗寒冷脅迫，另外常溫下基因不表達(dá)，避免了細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)和能量的浪費(fèi)

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