諾如病毒是一種單鏈RNA 病毒，可引起流行性急性腸胃炎的重要病原體。諾如病毒衣殼P蛋白上含有抗原位點和受體識別位點，在體外可單獨表達，被用于疫苗的免疫實驗研究。

（1）人體感染諾如病毒后，會引發(fā)

特異性免疫（體液免疫）

特異性免疫（體液免疫）

免疫，在康復者血清中能夠檢測到

抗體

抗體

（物質(zhì)）。有研究表明感染后第 180 天記憶B細胞仍具有持久性，說明這些細胞對機體具有

潛在的長期保護（預防再次感染）

潛在的長期保護（預防再次感染）

作用。
（2）研究人員希望借P蛋白治療由β蛋白沉積導致的阿爾茨海默癥，選取β蛋白作為免疫原，利用諾如病毒P顆粒作為疫苗載體，研究其免疫原性。研究人員將β蛋白基因插入P蛋白基因的恰當位置，制備了重組P蛋白基因P-β（1780bp）后，采用雙酶切方法，通過NdeⅠ和XhoⅠ酶和pET載體質(zhì)粒（5230bp）構建重組質(zhì)粒pET-P-β，如圖1．對照組應選用

②③

②③

。（多選，填寫各項目前的序號。）
①諾如病毒RNA
②P蛋白基因與pET載體質(zhì)粒構建的重組質(zhì)粒pET-P
③pET載體質(zhì)粒
（3）為了鑒定重組質(zhì)粒pET-P-β是否構建成功，NdeⅠ和XhoⅠ酶分別對重組質(zhì)粒pET-P-β和pET載體質(zhì)粒進行酶切，然后酶切片段和重組P蛋白基因進行電泳，請將你判斷的電泳結(jié)果畫到表中對應的泳道上。

DNA標記	P-β	pET	pET-P-β

（4）想要獲得目的蛋白，需要將構建的重組質(zhì)粒pET-P-β、pET-P和pET分別轉(zhuǎn)入用

Ca²⁺（CaCl₂）

Ca²⁺（CaCl₂）

處理的成為感受態(tài)的大腸桿菌細胞，培養(yǎng)處理后提取蛋白質(zhì)。過程如下：
若干健康小鼠隨機分為3組，將提取的蛋白質(zhì)分別溶于PBS緩沖液，對小鼠進行皮下免疫，并對4次免疫后的血清進行不同梯度稀釋，用

β蛋白

β蛋白

（β蛋白/P蛋白）作為抗原，通過免疫法檢測重組P-β蛋白的免疫原性。如圖2所示，請據(jù)圖描述出能夠表明P-β蛋白可以在小鼠體內(nèi)引起免疫反應，具有特異的免疫原性的實驗結(jié)果。