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生長素參與植物生長發(fā)育的調(diào)節(jié)，生長素運輸?shù)鞍祝≒INI）對IAA的極性運輸具有重要作用。為研究35S啟動子（一種來自病毒的強啟動子）能否引起下游基因的過量表達，研究人員將35S啟動子與PINI基因轉(zhuǎn)入擬南芥，觀察PINI過量表達對植物的影響。
（1）獲取PINI基因的mRNA后，通過RTPCR擴增獲取PINI基因（DNA）時所需要的酶是
逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶
逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶
。每次PCR循環(huán)分為3步，其中所需溫度最低的一步稱為
復(fù)性
復(fù)性
。
（2）PINI基因不能直接導入受體細胞，需要構(gòu)建PINI表達載體。構(gòu)建PINI表達載體的目的是
保證PINI在受體細胞中穩(wěn)定存在和表達
保證PINI在受體細胞中穩(wěn)定存在和表達
。
（3）為將PINI基因以正確方向插入質(zhì)粒需要雙酶切。在設(shè)計引物時，需在引物的5'端加入相應(yīng)的酶切位點。據(jù)圖1分析，構(gòu)建基因表達載體時，應(yīng)選用的限制酶是
EcoRⅠ和PstⅠ
EcoRⅠ和PstⅠ
。
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（4）提取轉(zhuǎn)基因擬南芥的DNA，用相應(yīng)引物擴增出35S啟動子和PINI基因，為檢測目的基因是否導入擬南芥，應(yīng)電泳檢測擴增產(chǎn)物中的
35S
35S
，不檢測另一種的原因是
啟動子
啟動子
。據(jù)圖2可知，也可在個體水平上進行檢測，方法是
本實驗的目的是要探究PINI過量表達對植物的影響，因此需要首先確定35S是否存在使用除草劑來檢測轉(zhuǎn)基因植物對除草劑的抗性
本實驗的目的是要探究PINI過量表達對植物的影響，因此需要首先確定35S是否存在使用除草劑來檢測轉(zhuǎn)基因植物對除草劑的抗性
。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄酶和耐高溫的DNA聚合酶；復(fù)性；保證PINI在受體細胞中穩(wěn)定存在和表達；EcoRⅠ和PstⅠ；35S；啟動子；本實驗的目的是要探究PINI過量表達對植物的影響，因此需要首先確定35S是否存在使用除草劑來檢測轉(zhuǎn)基因植物對除草劑的抗性
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/20 8:0:9組卷：6引用：2難度：0.5
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  • 1．利用基因工程生產(chǎn)羧酸酯酶（CarE）制劑的流程如圖所示，下列敘述不正確的是（　?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/201711/197/1bd70dc0.png" style="vertical-align:middle" />

    發(fā)布：2024/10/28 21:30:2組卷：25引用：2難度：0.7

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    發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.7

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    （1科學家改造乳酸脫氫酶時需要做的第一步是
     
    。研究發(fā)現(xiàn)，要將LDH基因改造成為mLDH（改造后的乳酸脫氫酶）基因，需將LDH第52位的酪氨酸替換為亮氨酸，使得活性中心增大，才能用于生產(chǎn)苯乳酸。
    ①先將LDH基因片段連人載體中，形成環(huán)狀質(zhì)粒（如圖1）。
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    將突變后的序列設(shè)計在引物1中，以環(huán)狀質(zhì)粒為PCR的
     
    ，再向體系中加入四種脫氧核苷酸、耐高溫的DNA聚合酶、
     
    ，以及堿基替換了的引物擴增LDH基因，PCR產(chǎn)物的序列便引入了預(yù)期的突變。
    ②上述PCR產(chǎn)物為鏈狀DNA分子，改造后的LDH基因序列位于PCR產(chǎn)物的兩側(cè)，需要用
     
    酶將產(chǎn)物兩端連接，獲得含有mLDH基因的質(zhì)粒。
    （2）產(chǎn)生苯乳酸的過程還需FDH酶參與。現(xiàn)需要構(gòu)建同時含有mLDH、FDH的基因表達載體。請你根據(jù)圖2，提出將兩個基因依次連入載體的思路：
     
    （要體現(xiàn)選用的內(nèi)切酶和連接的先后順序）。
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    （3）上述科學實踐屬于生物工程中的
     
    工程。在生命科學高速發(fā)展的今天，基因改造已十分成熟，但有一些紅線不能觸碰，請你舉出一例我國明令禁止的生物工程應(yīng)用：
     
    。

    發(fā)布：2024/10/28 17:0:2組卷：9引用：2難度：0.6
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