腸道病毒71型（EV71）為單股正鏈RNA病毒，是引起手足口病的主要病原體之一。在EV71中，病毒結(jié)構(gòu)蛋白1（VP1）為主要的中和抗原（中和抗原與中和抗體結(jié)合后能阻止病原體入侵與增殖），圖1為利用重組大腸桿菌表達(dá)VP1蛋白，并以VP1蛋白為抗原制備單克隆抗體的過(guò)程?；卮鹨韵聠?wèn)題。

（1）重組大腸桿菌中，由EV71病毒的RNA構(gòu)建cDNA需經(jīng)過(guò)

逆轉(zhuǎn)錄

逆轉(zhuǎn)錄

過(guò)程，隨后cDNA通過(guò)PCR技術(shù)擴(kuò)增。將目的基因?qū)氪竽c桿菌需要構(gòu)建表達(dá)載體，常用的表達(dá)載體是

質(zhì)粒

質(zhì)粒

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（2）在小鼠腹腔內(nèi)注射VP1蛋白進(jìn)行免疫，在35天獲取B淋巴細(xì)胞懸液進(jìn)行融合。在獲取B淋巴細(xì)胞前3天需在腹腔再次注射VP1蛋白，這樣做的原因是

二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多

二次免疫后，產(chǎn)生的B淋巴細(xì)胞更多

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（3）缺失HPRT基因的細(xì)胞無(wú)法在HAT培養(yǎng)基中生存，HAT培養(yǎng)基可以篩選出骨髓瘤細(xì)胞與B淋巴細(xì)胞融合的雜交瘤細(xì)胞，其它細(xì)胞都會(huì)死亡。據(jù)此推測(cè)，在單克隆抗體制備過(guò)程中缺失HPRT基因的細(xì)胞是

骨髓瘤細(xì)胞

骨髓瘤細(xì)胞

（填“大腸桿菌”“B淋巴細(xì)胞”“骨髓瘤細(xì)胞”）。
（4）在雜交瘤細(xì)胞篩選培養(yǎng)過(guò)程中需在培養(yǎng)基中添加胎牛血清，并置于37℃、50mL/LCO₂培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。培養(yǎng)箱中CO₂的作用是

維持pH值穩(wěn)定

維持pH值穩(wěn)定

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（5）圖2是研究人員對(duì)不同單克隆抗體（A/B）的檢測(cè)結(jié)果。哪一種單克隆抗體適合進(jìn)入下一步研制？判斷并說(shuō)出理由：

單克隆抗體A；能特異性的識(shí)別病毒且中和效果好

單克隆抗體A；能特異性的識(shí)別病毒且中和效果好

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（6）該單克隆抗體成功制備后，對(duì)于防治手足口病有什么作用？

快速檢測(cè)是否感染，有效治療患者

快速檢測(cè)是否感染，有效治療患者

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