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人類乳頭瘤病毒(HPV)有多種亞型,HPV45屬于高危型,與宮頸癌的發(fā)生密切相關。L1蛋白是組成HPV病毒衣殼的主要結構蛋白,科研人員進行了HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體的制備與研究?;卮鹣铝袉栴}:
(1)提取HPV45的L1蛋白,注射到小鼠體內,其目的是
誘導小鼠產生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞
誘導小鼠產生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞
。一段時間后,取小鼠脾臟組織,剪碎用
胰蛋白/膠原蛋白酶
胰蛋白/膠原蛋白酶
酶處理,使其分散成單個細胞制成細胞懸液,與小鼠骨髓瘤細胞誘導融合,篩選出雜交瘤細胞。
(2)將得到的雜交瘤細胞接種到多孔培養(yǎng)板進行
克隆化
克隆化
培養(yǎng),分別取其上清液進行
抗體陽性/抗體
抗體陽性/抗體
檢測,檢測的原理及操作流程如圖1。經多次篩選后,取A、B、C、D四種雜交瘤細胞上清液進行檢測,結果如圖2。
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①據圖分析,實驗過程中需將
L1蛋白
L1蛋白
作為抗原固定在固相載體上,分別取
不同稀釋倍數(濃度)的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清
不同稀釋倍數(濃度)的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清
加入反應體系,經洗滌后加入酶標抗體形成復合物,再次洗滌,加入相應底物,復合物攜帶的酶可與相應底物反應顯色,測吸光值,顏色越深吸光值越高。
②圖2結果表明
四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結合能力最強
四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結合能力最強
。
③依據圖2結果,研究人員推測A、B、C、D四種上清液中,A上清液的抗體與L1蛋白結合的位點是HPV45型病毒識別并侵染人體細胞的關鍵位點。為探究此推測,進行實驗,
實驗步驟如下:
步驟一:將小鼠宮頸細胞懸液均分為四組,編號甲、乙、丙、?。?br />步驟二:從稀釋倍數為1:320的A、B、C、D(雜交瘤細胞)上清液中分離提純抗體,
分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中
分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中

步驟三:在相同且適宜的條件下培養(yǎng)一段時間,檢測培養(yǎng)液中被侵染的宮頸細胞比例。實驗預期結果與結論:若
甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組
甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組
,則推測正確。
(3)科研人員制備HPV45的抗L1蛋白單克隆抗體,在醫(yī)學方面的應用有
用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運載藥物)
用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運載藥物)

【答案】誘導小鼠產生能夠分泌抗L1蛋白抗體的B淋巴細胞;胰蛋白/膠原蛋白酶;克隆化;抗體陽性/抗體;L1蛋白;不同稀釋倍數(濃度)的4種雜交瘤細胞上清液和未免疫小鼠血清;四種雜交瘤細胞上清液均含有能與L1蛋白結合的抗體,且上清液A中抗體與L1蛋白結合能力最強;分別與HPV45型病毒混合,再加入到小鼠宮頸細胞懸液甲、乙、丙、丁中;甲組中被侵染的宮頸細胞比例最高/甲組中被侵染的宮頸細胞比例高于其他組;用于HPV45病毒感染的診斷、治療、運載藥物(或診斷試劑、治療疾病、運載藥物)
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/7/5 8:0:9組卷:2引用:2難度:0.6
相似題
  • 1.Graves?。℅D)可導致甲狀腺功能亢進。研究發(fā)現,GD患者甲狀腺細胞表面表達大量細胞間黏附分子1(ICAM1),導致甲狀腺腫大??蒲腥藛T通過制備單克隆抗體,對治療GD進行了嘗試。
    (1)用ICAM1作為抗原間隔多次免疫若干只小鼠,幾周后取這些免疫小鼠的血清,分別加入多孔培養(yǎng)板的不同孔中,多孔培養(yǎng)板中需加入
     
    以檢測這些小鼠產生的抗體。依據反應結果,選出抗原—抗體反應最
     
    (填“強”或“弱”)的培養(yǎng)孔所對應的小鼠M。
    (2)取小鼠M的脾臟細胞制成細胞懸液,與實驗用骨髓瘤細胞進行融合,用選擇培養(yǎng)基篩選得到具有
     
    能力的細胞。核酸合成有兩個途徑,物質A可以阻斷其中的全合成途徑(如圖)。正常細胞內含有補救合成途徑所必需的轉化酶和激酶,制備單克隆抗體時選用的骨髓瘤細胞中缺乏轉化酶??捎眉尤際、A、T三種物質的“HAT培養(yǎng)基”篩選出特定的雜交瘤細胞。
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    融合前將部分培養(yǎng)細胞置于含HAT的選擇培養(yǎng)基中培養(yǎng),一段時間后培養(yǎng)基中
     
    (填“有”或“無”)骨髓瘤細胞生長,說明培養(yǎng)基符合實驗要求。雜交瘤細胞可以在HAT培養(yǎng)基上大量增殖的原因是
     
    。
    (3)將獲得的上述細胞在多孔培養(yǎng)板上培養(yǎng),用ICAM1檢測,從中選擇
     
    的雜交瘤細胞,將其植入小鼠腹腔中進行克隆培養(yǎng),一段時間后從小鼠腹水中提取實驗用抗體。

    發(fā)布:2024/9/25 5:0:1組卷:7難度:0.6
  • 2.閱讀下列資料,回答相關問題:
    資料1:用小鼠制備的抗人絨毛膜促性腺激素單克隆抗體做成的“早早孕試劑盒”,檢測早孕的準確率在90%以上。
    資料2:葡萄糖異構酶在工業(yè)上應用廣泛,為提高其熱穩(wěn)定性,朱國萍等人在確定第138位甘氨酸為目標氨基酸后,用有效方法以脯氨酸替代甘氨酸,結果其最適反應溫度提高了10-12℃,使蛋白質空間結構更具剛性。
    資料3:目前科學家已在牛和羊等動物的乳腺生物反應器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白、生長激素等重要藥品,大致過程如圖所示:
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    資料4:十九大提出“既要金山銀山,又要綠水藍天”,要實現這一目標不僅需要對破壞的生態(tài)環(huán)境進行恢復,還要考慮當地人的經濟發(fā)展和生活需要。
    (1)資料1中,在該“單抗”的生產過程中,將
     
    作為抗原對小鼠進行接種后,從脾臟中提取B淋巴細胞,并設法將其與鼠的骨髓瘤細胞融合,再用特定的選擇培養(yǎng)基進行篩選,選出融合的雜種細胞,對該細胞還需進行
     
    培養(yǎng)和抗體檢測,經多次篩選,就可獲得足夠數量的符合需要的雜交瘤細胞。單克隆抗體最主要的優(yōu)點是
     
    。
    (2)資料2中提到的生物技術屬于
     
    工程的范疇。在該實例中,直接需要操作的是
     
    (選填“肽鏈結構”、“蛋白質空間結構”、“基因結構”)。
    (4)資料3中哺乳動物的體外受精主要包括[a]
     
    、[b]
     
    和受精等幾個主要步驟。若要充分發(fā)揮優(yōu)良母畜的繁殖潛能,可給供體注射
     
    ,使其排出更多的卵子。若要一次獲得多只完全相同的轉基因牛,應采用胚胎分割技術,通常選擇發(fā)育良好、形態(tài)正常的
     
    或桑葚胚。
    (5)資料4主要遵循了生態(tài)工程的
     
    原理。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:6引用:1難度:0.7
  • 3.如圖是單克隆抗體制備過程示意圖,1~3代表相關過程,a~e代表相關細胞,其中c是兩兩融合的細胞。以下敘述錯誤的是(  )
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    發(fā)布:2024/10/26 4:30:4組卷:60引用:3難度:0.7
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