生物柴油作為新型能源已經(jīng)成為世界上應(yīng)用最廣泛、發(fā)展迅猛的可再生能源之一。研究人員利用基因工程的方法，將油料作物紫蘇的產(chǎn)油基因DGAT1與含有氨芐青霉素抗性基因的pMD克隆質(zhì)粒構(gòu)建pMD—DGAT1重組質(zhì)粒，然后導(dǎo)入大腸桿菌擴(kuò)大培養(yǎng)；再提取出擴(kuò)增的pMD—DGAT1克隆質(zhì)粒，與pBI121空載體同時用XbaI、BamH I兩種酶酶切，構(gòu)建pBI121—DGAT1表達(dá)載體：最后將表達(dá)載體導(dǎo)入四尾柵藻獲得產(chǎn)油微藻，利用地?zé)釓U水培養(yǎng)產(chǎn)油微藻不僅能生產(chǎn)生物柴油，還能治理地?zé)釓U水。
（1）提取紫蘇組織細(xì)胞RNA經(jīng)過逆轉(zhuǎn)錄逆轉(zhuǎn)錄得到cDNA，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增得到DGAT1基因。在PCR擴(kuò)增之前，需要對DGAT1基因進(jìn)行一次預(yù)變性的目的是提高DGAT1基因的變性概率提高DGAT1基因的變性概率；在擴(kuò)增DGAT1基因時，需要根據(jù)DGAT1基因兩端核苷酸序列DGAT1基因兩端核苷酸序列設(shè)計特異性引物序列。
（2）在配制培養(yǎng)大腸桿菌的培養(yǎng)基時，要在培養(yǎng)基滅菌并冷卻到30℃左右后，加入用無菌水配制的適宜濃度的氨芐青霉素溶液，氨芐青霉素不能與培養(yǎng)基一同滅菌的原因可能是高溫會破壞氨芐青霉素的結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致失效高溫會破壞氨芐青霉素的結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致失效。
（3）將DGAT1基因插入到pBI121空載體的啟動子與終止子之間的目的是保證DGAT1基因能在產(chǎn)油微藻細(xì)胞中表達(dá)保證DGAT1基因能在產(chǎn)油微藻細(xì)胞中表達(dá)。若用DGAT1基因探針檢測產(chǎn)油微藻，能檢測到細(xì)胞中的DGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNADGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNA；判斷產(chǎn)油微藻細(xì)胞中DGAT1基因是否成功表達(dá)，需要加入DGAT1抗體DGAT1抗體進(jìn)行檢測。
（4）為檢測產(chǎn)油微藻對地?zé)釓U水的去污能力，研究人員設(shè)計實驗并得到相應(yīng)實驗結(jié)果如表。
| 指標(biāo) | 總氮（mg/L） | 總磷（mg/L） | 氟化物（mg/L） |
| 廢水培養(yǎng)基 | 23.2 | 4.32 | 4.56 |
| 培養(yǎng)轉(zhuǎn)基因產(chǎn)油微藻11天后 | 1.9 | 0.45 | 0.84 |
添加用地?zé)釓U水培養(yǎng)四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
添加用地?zé)釓U水培養(yǎng)四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
。【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】逆轉(zhuǎn)錄；提高DGAT1基因的變性概率；DGAT1基因兩端核苷酸序列；高溫會破壞氨芐青霉素的結(jié)構(gòu)而導(dǎo)致失效；保證DGAT1基因能在產(chǎn)油微藻細(xì)胞中表達(dá)；DGAT1基因及其轉(zhuǎn)錄出的mRNA；DGAT1抗體；添加用地?zé)釓U水培養(yǎng)四尾柵藻的對照組，11天后檢測總氮、總磷和氟化物的含量
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：24引用：3難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
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3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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