農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上的T-DNA（序列已知）可以轉(zhuǎn)移并隨機插入被侵染植物的染色體DNA中。研究者將圖1中被侵染植物的DNA片段連接成環(huán)，并以此環(huán)為模板，利用PCR技術擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列，進一步分析可確定T-DNA插入的具體位置。T-DNA的序列如圖2所示，虛線處省略了部分核苷酸序列。已知SalⅠ酶的識別序列為5'G↓TCGAC3'。
（1）PCR技術擴增時起關鍵作用的酶是 Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶），其作用是 將游離的脫氧核苷酸連到引物的3'端將游離的脫氧核苷酸連到引物的3'端。
（2）擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列時，需要先根據(jù) T-DNA基因兩端已知的堿基序列T-DNA基因兩端已知的堿基序列設計兩種特異性引物序列，利用圖中的引物 ①④①④組合可擴增出T-DNA兩側(cè)的未知序列。
（3）若只使用一種引物，通過PCR技術制備與T-DNA的b鏈相同的單鏈作為某些檢測的探針，則所選擇引物由5'→3'的前5個堿基序列為 5′-CTGTC-3′5′-CTGTC-3′。
（4）對PCR產(chǎn)物測序，經(jīng)分析得到了圖1中的未知序列。下列DNA單鏈序列中（虛線處省略了部分核苷酸序列），可能正確的是 AA。
A．5'-TCGACCACG_____ATGTCGA-3'
B．5-AATTCCATG_____CTGAATT-3'
C．5'-GCAATGCGT_____TCGGGAA-3'
D．5'-TTGATACGC_____CGAGTAC-3'
（5）PCR技術擴增出T-DNA插入位置兩側(cè)的未知序列后，擴增產(chǎn)物可用 瓊脂糖凝膠電泳瓊脂糖凝膠電泳技術進行鑒定。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】Taq酶（或耐高溫的DNA聚合酶）；將游離的脫氧核苷酸連到引物的3'端；T-DNA基因兩端已知的堿基序列；①④；5′-CTGTC-3′；A；瓊脂糖凝膠電泳
【解答】
【點評】
聲明：本試題解析著作權屬菁優(yōu)網(wǎng)所有，未經(jīng)書面同意，不得復制發(fā)布。
發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：1難度：0.5
相似題
-
1．數(shù)字PCR技術是一種核酸分子絕對定量技術，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．科學家為了提高光合作用過程中Rubiaco酶對CO2的親和力，利用PCR定點突變技術改造Rubisco酶基因，從而顯著提高了植物的光合作用速率。請回答下列問題：
（1）PCR定點突變技術屬于（填“基因工程”或“蛋白質(zhì)工程”）?？衫枚c突變的DNA構建基因表達載體，常用將基因表達載體導入植物細胞，還需用到植物細胞工程中的技術，才能最終獲得轉(zhuǎn)基因植物。
（2）PCR過程所依據(jù)的原理是。利用PCR技術擴增，若將一個目的基因復制10次，則需要在緩沖液中至少加入個引物。
（3）目的基因進入受體細胞內(nèi)，并在受體細胞內(nèi)維持穩(wěn)定和表達的過程稱為?？蒲腥藛T通過實驗研究發(fā)現(xiàn)培育的該轉(zhuǎn)基因植株的光合作用速率并未明顯增大，可能的原因是。
（4）另有一些科學家利用生物技術將人的生長激素基因?qū)胄∈笫芫训募毎酥?，?jīng)培育獲得一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細胞可以合成人的生長激素并分泌到尿液中。有關敘述錯誤的是。
A．選擇受精卵作為外源基因的受體細胞是因為這種細胞的全能性最容易表達
B．采用DNA分子雜交技術可檢測外源基因在小鼠細胞內(nèi)是否成功表達
C．人的生長激素基因能在小鼠細胞表達，說明遺傳密碼在不同種生物中可以通用
D．將轉(zhuǎn)基因小鼠體細胞進行核移植（克隆），可以獲得多個具有外源基因的后代發(fā)布：2025/1/16 8:0:1組卷：14引用：2難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7