乳糖酶能夠催化乳糖水解為葡萄糖和半乳糖，在工業(yè)生產(chǎn)中具有重要價(jià)值。乳糖酶的制備及固定化步驟如表所示?；卮鹣铝袉栴}：

產(chǎn)乳糖酶微生物L(fēng)的篩選

→

產(chǎn)乳糖酶微生物L(fēng)的培養(yǎng)

→

乳糖酶的提取純化

→

乳糖酶的固定化

（1）篩選產(chǎn)乳糖酶的微生物L(fēng)時(shí)，培養(yǎng)基中的唯一碳源應(yīng)該是

乳糖

乳糖

，在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)微生物L(fēng)時(shí)，一方面需要為微生物L(fēng)提供合適的營(yíng)養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面需要

防止外來雜菌的入侵

防止外來雜菌的入侵

，以獲得純凈的培養(yǎng)物。
（2）為了得到產(chǎn)乳糖酶微生物L(fēng)的單菌落，可用

稀釋涂布平板

稀釋涂布平板

法將樣本接種于固體培養(yǎng)基表面，經(jīng)過選擇培養(yǎng)、鑒別等步驟獲得。對(duì)于需要長(zhǎng)期保存的菌種，可以采用

甘油管藏

甘油管藏

的方法。
（3）將微生物L(fēng)研磨破碎得到提取液后，可采用凝膠色譜法分離純化其中的乳糖酶，分離過程中，比乳糖酶相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)，在凝膠中的移動(dòng)速度比乳糖酶慢，原因是

相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道

相對(duì)分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道

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（4）工業(yè)生產(chǎn)中若要將乳糖酶固定化，部分操作如下：將乳糖酶固定在

不溶于水

不溶于水

（填“溶于水”或“不溶于水”）的載體上，將其裝入反應(yīng)柱內(nèi)后，需用蒸餾水充分洗滌固定化酶柱，以除去未吸附的乳糖酶。一般來說，酶不適合采用

包埋

包埋

法固定化，原因是

體積小，容易從包埋材料中漏出

體積小，容易從包埋材料中漏出

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（5）酒精發(fā)酵過程應(yīng)采用固定化細(xì)胞（固定化酵母）技術(shù)而不是固定化酶技術(shù)，原因是

酒精發(fā)酵需要一系列酶催化，只有固定化細(xì)胞可固定系列酶，并催化一系列化學(xué)反應(yīng)

酒精發(fā)酵需要一系列酶催化，只有固定化細(xì)胞可固定系列酶，并催化一系列化學(xué)反應(yīng)

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