人體移植器官短缺是一個世界性難題。目前科學(xué)家正試圖利用基因工程方法對哺乳動物器官進行改造，欲培育出沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官，設(shè)計操作過程如圖：

（1）過程一：獲取供體組織塊并剪碎后，需用

胰蛋白（或膠原蛋白）

胰蛋白（或膠原蛋白）

酶處理，使組織細(xì)胞分散。動物細(xì)胞培養(yǎng)需要CO₂，其作用是

維持培養(yǎng)液的pH

維持培養(yǎng)液的pH

。
（2）過程二：Cas9作用于磷酸二酯鍵將α-Gal抗原基因從供體DNA中敲除，可判斷Cas9是

限制

限制

酶。將含有α-Gal抗原基因的DNA片段用放射性同位素標(biāo)記作為探針，使探針與②細(xì)胞的DNA雜交，若

不能顯示出雜交帶

不能顯示出雜交帶

，則表明該基因已成功敲除。
（3）過程三：將人類補體調(diào)節(jié)蛋白基因用顯微注射技術(shù)導(dǎo)入受體細(xì)胞，在

Cas9（或限制酶）和DNA連接

Cas9（或限制酶）和DNA連接

酶的作用下，將該基因與②細(xì)胞的DNA進行定點整合。檢測人類補體調(diào)節(jié)蛋白基因是否成功表達，可用

抗原一抗體雜交

抗原一抗體雜交

技術(shù)。
（4）過程五：核移植后的重組細(xì)胞可以發(fā)育成為基因修飾克隆供體是因為

該重組細(xì)胞的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)全部來自于基因修飾的供體，并且該動物細(xì)胞核有全能性

該重組細(xì)胞的細(xì)胞核遺傳物質(zhì)全部來自于基因修飾的供體，并且該動物細(xì)胞核有全能性

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