CAR—T細(xì)胞療法是通過(guò)設(shè)計(jì)CAR基因，并導(dǎo)入癌癥患者的T細(xì)胞中，使其轉(zhuǎn)化為CAR-T細(xì)胞，CAR-T細(xì)胞膜上的CAR蛋白與癌細(xì)胞表面抗原特異結(jié)合后，激活CAR-T細(xì)胞使其增殖、分化，從而實(shí)現(xiàn)對(duì)癌細(xì)胞的特異性殺傷和記憶，主要過(guò)程如下圖。
請(qǐng)回答：
（1）要獲取CAR基因，可采取PCR技術(shù)進(jìn)行大量擴(kuò)增，前提是 CAR基因序列已知CAR基因序列已知。
（2）連接形成pCDH—CAR上除了目的基因外，還有一些必須的部分，比如啟動(dòng)子和終止子，其中啟動(dòng)子是 RNA聚合酶RNA聚合酶識(shí)別結(jié)合位點(diǎn)。
（3）完成過(guò)程②常用方法是 顯微注射顯微注射法。此外，還可以先將CAR基因整合到逆轉(zhuǎn)錄病毒載體中，將CAR基因整合到T細(xì)胞的 染色體DNA染色體DNA上。
（4）檢測(cè)CAR-T細(xì)胞中的CAR基因是否表達(dá)了所采用的方法是 抗原-抗體雜交技術(shù)抗原-抗體雜交技術(shù)。
（5）在將CAR-T細(xì)胞輸給病人進(jìn)行治療之前，還需在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)進(jìn)行細(xì)胞擴(kuò)增培養(yǎng)。體外培養(yǎng)CAR-T細(xì)胞的培養(yǎng)液中除合成培養(yǎng)基的成分外，一般還需添加 動(dòng)物血清動(dòng)物血清等天然成分。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過(guò)程綜合．
【答案】CAR基因序列已知；RNA聚合酶；顯微注射；染色體DNA；抗原-抗體雜交技術(shù)；動(dòng)物血清
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/21 8:0:10組卷：1引用：1難度：0.6
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過(guò)基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問(wèn)題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開(kāi)始時(shí)，解開(kāi)DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過(guò)程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見(jiàn)的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒(méi)有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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