絞股藍細胞中含有抗煙草花葉病毒(TMV)基因,能合成抗TMV蛋白,使絞股藍葉片能抗TMV感染??蒲腥藛T利用轉基因技術將絞股藍細胞中的抗TMV基因轉入煙草細胞,培育出了抗TMV的煙草,主要流程如圖所示。請分析圖并回答問題:
(1)從絞股藍細胞中提取抗TMV基因轉錄的RNA,合成目的基因。過程①需要的酶是逆轉錄酶逆轉錄酶。利用PCR技術擴增目的基因時,反應體系中除有緩沖液、原料(dNTP)、目的基因外,還應含有引物和Taq酶引物和Taq酶。
(2)由①獲得的目的基因在構建表達載體時,應在目的基因的首端和尾端分別添加啟動子和終止子啟動子和終止子,同時為了與表達載體連接,通常在兩端插入不同的限制性酶切位點,主要原因是使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化。由圖可知,在過程③中應將目的基因插入Ti質粒的T-DNA上,同時該片段中還應有卡那霉素卡那霉素抗性基因。
(3)將含抗TMV基因的煙草細胞經(jīng)⑤獲得再生植株的生物技術是植物組織培養(yǎng)植物組織培養(yǎng)。這項技術不僅能實現(xiàn)快速繁殖作物還能保持優(yōu)良品種的遺傳特性遺傳特性。
(4)過程⑥在個體生物學水平鑒定,需要做TMV接種TMV接種實驗,可檢測植株是否具有抗性以及抗性的強度。
【考點】植物的組織培養(yǎng).
【答案】逆轉錄酶;引物和Taq酶;啟動子和終止子;使目的基因能定向插入表達載體,避免自身環(huán)化;卡那霉素;植物組織培養(yǎng);遺傳特性;TMV接種
【解答】
【點評】
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