研究人員利用小鼠的單倍體ES細(xì)胞（只有一個(gè)染色體組），成功培有出轉(zhuǎn)基因小鼠。其主要技術(shù)流程如圖1所示，請分析并回答下列問題：
注：Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ代表四種限制酶。箭頭指向的位置為限制酶的切割位點(diǎn)；Amp'是氨芐青霉素抗性基因，Neo'是G418抗性基因。
（1）利用PCR技術(shù)可以擴(kuò)增目的基因，PCR反應(yīng)體系中除含緩沖液、模板DNA、dNTP、引物外，還應(yīng)含有熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）；引物應(yīng)選用圖2中A和DA和D（填圖中字母）。
注：A、B、C、D是引物，箭頭是延伸方向。
（2）在基因工程操作步驟中，過程①②稱為基因表達(dá)載體的構(gòu)建基因表達(dá)載體的構(gòu)建，重組質(zhì)粒上的抗生素抗性基因可作為標(biāo)記基因標(biāo)記基因。已知氨芐青霉素不能有效殺死小鼠細(xì)胞，而一定濃度的G418能有效殺死不具有Neor的小鼠細(xì)胞。結(jié)合圖2推測，過程①選用的兩種限制酶是Ⅰ和ⅡⅠ和Ⅱ（填圖1中的編號），③處的培養(yǎng)液應(yīng)添加G418G418（填“氨芐青霉素”或“G418”）。
（3）據(jù)圖分析，細(xì)胞乙發(fā)育成桑葚胚的過程中細(xì)胞分裂方式是有絲分裂有絲分裂，將細(xì)胞乙培養(yǎng)成桑葚胚的技術(shù)稱為早期胚胎培養(yǎng)早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】熱穩(wěn)定性DNA聚合酶（Taq酶）；A和D；基因表達(dá)載體的構(gòu)建；標(biāo)記基因；Ⅰ和Ⅱ；G418；有絲分裂；早期胚胎培養(yǎng)
【解答】
【點(diǎn)評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：7引用：1難度：0.7
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力。回答下列問題：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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