普通PCR在擴增DNA的過程中存在一定概率的堿基錯誤配對，得到部分的錯誤產(chǎn)物。巢式PCR是一種在普通PCR基礎上改良的新型PCR技術(shù)，擴增的精確性比普通PCR更高。巢式PCR對目標DNA進行擴增時需要用到兩對不同的引物，首先使用第一對引物（外引物）對目標DNA進行第一次擴增得到中間產(chǎn)物，然后使用第二對引物（內(nèi)引物）對中間產(chǎn)物進行第二次擴增得到目標產(chǎn)物，過程如圖所示。請回答相關問題：
（1）PCR的原理是 DNA的復制DNA的復制，PCR反應體系一般都需要加入一定量的，其作用是 激活DNA聚合酶激活DNA聚合酶。
（2）巢式PCR通常在第一支試管中進行第一次擴增，然后把得到的中間產(chǎn)物分離出來轉(zhuǎn)移到另外一支試管中進行第二次擴增反應，兩次擴增不在同一支試管中擴增的原因是 防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴增，無法實現(xiàn)巢式PCR高精確性擴增的目的防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴增，無法實現(xiàn)巢式PCR高精確性擴增的目的。使用瓊脂糖凝膠電泳對模板DNA與中間產(chǎn)物分離時，由于中間產(chǎn)物的分子量較小，所以相同時間內(nèi)在凝膠中的遷移距離更 大大。
（3）如果巢式PCR第一次擴增得到的某中間產(chǎn)物的部分堿基發(fā)生了替換，則第二次擴增時內(nèi)引物與該中間產(chǎn)物配對并擴增的概率 降低降低。如果想進一步減少錯誤目標產(chǎn)物的產(chǎn)生，還可以適當 提高提高（填“提高”或“降低”）復性的溫度。
【考點】DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】DNA的復制；激活DNA聚合酶；防止內(nèi)引物直接參與第一次的擴增，無法實現(xiàn)巢式PCR高精確性擴增的目的；大；降低；提高
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：5引用：2難度：0.5
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1．數(shù)字PCR技術(shù)是一種核酸分子絕對定量技術(shù)，其原理如圖所示。下列有關敘述正確的是（ ?。?img alt="菁優(yōu)網(wǎng)" src="https://img.jyeoo.net/quiz/images/202204/49/6d911ea3.png" style="vertical-align:middle" />
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：6引用：2難度：0.6 -
2．PCR技術(shù)不僅可以擴增目的基因，還可用于定點誘變目的基因等。大引物PCR就是一種定點突變技術(shù)。大引物PCR需要用到引物進行兩次PCR，其操作步驟為：
①根據(jù)目的基因序列設計引物，得到兩個常規(guī)引物，分別為常規(guī)上游引物和常規(guī)下游引物；
②根據(jù)突變堿基所處序列位置設計突變上游引物，突變位點位于突變引物序列的中間位置
③由突變上游引物與常規(guī)下游引物進行第一次PCR反應得到下游大引物；
④用得到的下游大引物中和另一個常規(guī)上游引物進行第二次PCR擴增，得到突變目的基因序列?；卮鹣铝袉栴}：
（1）PCR擴增的第一步是使雙鏈模板DNA變性。DNA中G+C的含量與變性要求的溫度有關，DNA中G+C的含量越多，要求的變性溫度越高。其原因是。該PCR擴增技術(shù)所需的基本條件是種引物、原料、模板、。
（2）在第一次PCR反應中，形成圖示雙鏈DNA至少要經(jīng)過次復制。第一次PCR的產(chǎn)物DNA的條鏈作為第二次PCR所用的引物。與X射線誘變相比，該突變技術(shù)的優(yōu)點是。
（3）如果要利用微生物進一步克隆PCR定點誘變產(chǎn)物，其步驟包括：、、微生物的篩選和培養(yǎng)、從菌群中獲取更多目的基因。將獲取目的基因和質(zhì)粒進行連接后，需先用處理農(nóng)桿菌以便將基因表達載體導入馬鈴薯細胞，將馬鈴薯細胞培養(yǎng)成幼苗時經(jīng)過的兩個過程是。檢測目的基因是否在馬鈴薯細胞中轉(zhuǎn)錄出了mRNA，所采用的方法是。發(fā)布：2024/12/30 23:0:2組卷：32引用：3難度：0.6 -
3．下列關于DNA片段擴增及其鑒定的說法錯誤的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/30 23:30:2組卷：3引用：3難度：0.7
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