轉(zhuǎn)基因玉米株系BBHTL8-1含有Cry1Ab、Cry3Bb、cp4epsps、ZmHPT和ZmTMT共5個(gè)基因,每個(gè)基因和其他結(jié)構(gòu)構(gòu)成一個(gè)基因表達(dá)框(見圖),且它們構(gòu)建在一個(gè)載體上。外源插入片段位于玉米基因組第4染色體。結(jié)合所學(xué)內(nèi)容回答以下問題:
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備注:Cry1Ab(抗鱗翅目害蟲基因)、Cry3Bb(抗鞘翅目害蟲基因)、cp4epsps[耐草甘膦(除草劑)基因]、ZmHPT和ZmTMT(維生素E合成途徑兩個(gè)關(guān)鍵基因)。LB、RB(基因表達(dá)框的左右端),箭頭方向表示基因表達(dá)的方向。
(1)構(gòu)建基因表達(dá)框,需要的工具酶有 限制酶、DNA連接酶限制酶、DNA連接酶。
(2)若用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因轉(zhuǎn)入玉米細(xì)胞,圖示基因表達(dá)框需先整合到 農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)的Ti質(zhì)粒上的T-DNA中農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)的Ti質(zhì)粒上的T-DNA中。
(3)若圖示箭頭方向表示的是基因表達(dá)的方向,則pOsAct2應(yīng)該是 Cry3BbCry3Bb的啟動(dòng)子。若讓維生素E在玉米胚中特異性表達(dá),該特異性由圖中的 pGLB1pGLB1決定。
(4)若用PCR技術(shù)擴(kuò)增出Cry3Bb基因,需要設(shè)計(jì)特定的 引物引物,至少經(jīng)過 33輪才能得到完整的Cry3Bb基因。
(5)轉(zhuǎn)基因成功的玉米其優(yōu)良性狀不能穩(wěn)定遺傳,請(qǐng)簡要寫出培育出穩(wěn)定遺傳株系的方法 讓其不斷自交選擇穩(wěn)定遺傳個(gè)體讓其不斷自交選擇穩(wěn)定遺傳個(gè)體。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合;基因工程在農(nóng)牧、醫(yī)療、食品等方面的應(yīng)用.
【答案】限制酶、DNA連接酶;農(nóng)桿菌細(xì)胞內(nèi)的Ti質(zhì)粒上的T-DNA中;Cry3Bb;pGLB1;引物;3;讓其不斷自交選擇穩(wěn)定遺傳個(gè)體
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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