當(dāng)前位置： 2023-2024學(xué)年河北省秦皇島市青龍縣高三（上）聯(lián)考生物試卷（10月份）> 試題詳情

回答與基因工程和植物克隆有關(guān)的問題：

（1）從水稻體細(xì)胞中提取總RNA，利用
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
酶獲得B基因編碼蛋白的序列，將該序列和Luc基因（表達的熒光素酶能催化熒光素產(chǎn)生熒光）連接成的融合基因必須連接到表達載體的啟動子和終止子之間，其中啟動子是
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的結(jié)合位點。
（2）將重組載體導(dǎo)入農(nóng)桿菌時，常用氯化鈣處理農(nóng)桿菌的目的是
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性
。處理后再將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移到適宜培養(yǎng)液中培養(yǎng)一段時間，目的是
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)
。
（3）過程②利用了農(nóng)桿菌的T-DNA片段，將目的基因
整合（或轉(zhuǎn)移）
整合（或轉(zhuǎn)移）
到受體細(xì)胞的染色體DNA上，完成后需在培養(yǎng)基中添加
潮霉素
潮霉素
對水稻愈傷組織進行脫菌處理。
（4）借助Luc基因的表達來完成第二次鑒定篩選，具體方法是
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光
。
（5）在植物克隆中，盡量選擇
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分
性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分
的基因型。有研究人員將上述水稻愈傷組織反復(fù)擴增后再誘導(dǎo)，都以失敗告終，原因是在
多次繼代培養(yǎng)
多次繼代培養(yǎng)
后喪失細(xì)胞全能性的表達能力。

【答案】逆轉(zhuǎn)錄；RNA聚合酶；增加農(nóng)桿菌細(xì)胞壁的通透性；使農(nóng)桿菌恢復(fù)正常生理狀態(tài)；整合（或轉(zhuǎn)移）；潮霉素；檢測加入熒光素的細(xì)胞中是否發(fā)出熒光；性狀優(yōu)良、細(xì)胞全能性表達充分；多次繼代培養(yǎng)

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/9/27 11:0:2組卷：2引用：2難度：0.7

相似題

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　?。?/h2>

A．可以將目的基因直接導(dǎo)入受體細(xì)胞

B．實驗過程中采用顯微注射的方法導(dǎo)入目的基因

C．檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄的方法是抗原-抗體雜交

D．目的基因只存在于動物的乳腺細(xì)胞中

發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：5引用：1難度：0.9

解析

2．最近，科學(xué)家培育出一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其膀胱上皮細(xì)胞可以合成人的生長激素并將其分泌到尿液中．這是繼哺乳動物乳腺生物反應(yīng)器研發(fā)成功后，在膀胱生物反應(yīng)器研究上另一進展．
（1）將人的生長激素基因?qū)胄∈笫荏w細(xì)胞，常用的方法是

．所使用到儀器是

．
（2）在基因工程中，將目的基因與運載體結(jié)合時，必須用

酶和

酶．常用的運載體有

、

、

等，而作為運載體必須具備相應(yīng)的條件，例如應(yīng)具有

以便進行篩選．進行基因轉(zhuǎn)移時，通常要將外源基因轉(zhuǎn)入動物的

中，原因是

．
（3）通常采用

技術(shù)檢測外源基因是否插入了小鼠的基因組中．
（4）在研究膀胱生物反應(yīng)器時，應(yīng)使外源基因在小鼠的

細(xì)胞中特異性表達．
（5）如果將藥物蛋白基因轉(zhuǎn)入動物如牛、羊的膀胱上皮細(xì)胞中，從轉(zhuǎn)基因牛、羊尿液中提取藥物比從乳汁中提取藥物的更大優(yōu)越性在于

．
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：3引用：1難度：0.3
解析
3．抗凝血酶是一種天然抗凝血劑，在臨床上被廣泛應(yīng)用。目前科學(xué)家已在豬和羊等動物的乳腺生物反應(yīng)器中表達出了人的抗凝血酶，如圖是構(gòu)建抗凝血酶基因表達載體所用的pBR質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)及人抗凝血酶基因所在的DNA片段，回答下列問題：

（1）現(xiàn)有以下4種引物，引物A15'-GGACCCCGGG-3'；引物B：5'-CATTTCTAGA-3'；引物C：5'-CCTGGGGCCC-3'；引物D：5'-GTAAAGATCT-3'；，利用PCR擴增獲取抗凝血酶基因，應(yīng)選用引物

（填引物名稱），擴增產(chǎn)物可選擇限制酶

切割后再利用E?coliDNA連接酶連接到pBR質(zhì)粒上。
（2）所選用的pBR質(zhì)粒上含有啟動子，其作用是

，將構(gòu)建的基因表達載體先導(dǎo)入大腸桿菌細(xì)胞，然后將大腸桿菌涂布到含新霉素的選擇培養(yǎng)基上，長出了多個大腸桿菌菌落，這些菌落并非都是目的菌株，原因是

。
（3）將篩選得到的目的菌株提取質(zhì)粒，再通過

方法導(dǎo)入到豬或羊的

細(xì)胞內(nèi)，通過培養(yǎng)即可獲得能表達人抗凝血酶的乳腺生物反應(yīng)器。
發(fā)布：2024/10/26 17:0:2組卷：4引用：1難度：0.6
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1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（ ?。?/h2>

1．目前，科學(xué)家已在牛和山羊等動物乳腺生物反應(yīng)器中表達出了抗凝血酶、血清白蛋白等多種蛋白類藥物．下列與之相關(guān)的說法，正確的是（　?。?/h2>