為提高作物產(chǎn)量，種植業(yè)往往使用大量的氮素化肥，既增加了生產(chǎn)成本，又易造成環(huán)境污染。自生固氮菌營獨立生活，為改變這種現(xiàn)狀帶來了希望。某科研小組利用下面的培養(yǎng)基嘗試從土壤中分離固氮能力強的自生固氮菌，以便生產(chǎn)菌肥替代傳統(tǒng)化肥。請回答下列問題：
培養(yǎng)基配方表：

成分	葡萄糖	KH2PO4	MgSO4	NaCl	CaSO4	CaSO3	瓊脂	蒸餾水
用量	10g	0.2g	0.2g	0.2g	0.2g	5g	3.5g	1L

（1）配制培養(yǎng)基時，按配方表稱量、溶化、定容后需經(jīng)

高壓蒸汽滅菌

高壓蒸汽滅菌

法滅菌后再倒平板。此培養(yǎng)基能分離自生固氮菌的原因是

該培養(yǎng)基無氮源，只有固氮菌才能在此培養(yǎng)基上生長

該培養(yǎng)基無氮源，只有固氮菌才能在此培養(yǎng)基上生長

。
（2）為分離純化自生固氮菌及觀察自生固氮菌的菌落特征，需將土樣經(jīng)

梯度稀釋

梯度稀釋

后，用滅菌后的

接種環(huán)

接種環(huán)

（填接種工具名稱）采用

平板劃線法

平板劃線法

 將菌液接種到平板上培養(yǎng)。
（3）已知固氮酶的化學本質(zhì)為蛋白質(zhì)，不同的蛋白質(zhì)在不同濃度的鹽溶液中溶解度不同。為檢測分離得到的自生固氮菌的固氮酶活性，可將固氮菌細胞破碎后采用

鹽析

鹽析

法 分離出固氮酶，該方法的優(yōu)點是

既能分離出固氮酶，又不會破壞固氮酶的結(jié)構(gòu)而保持其活性

既能分離出固氮酶，又不會破壞固氮酶的結(jié)構(gòu)而保持其活性

。
（4）研究發(fā)現(xiàn)，土壤中碳含量降低，碳氮比低于40：1時，固氮菌的固氮作用迅速停止。因此純化后制作的優(yōu)良菌肥最好與

有機肥

有機肥

 （填“氮肥”“磷肥”“鉀肥”或“有機肥”）配合施用。