苯丙酮尿癥是單基因遺傳病，科學(xué)家將正?；駾導(dǎo)入該病患者的細胞，以治療該病。圖甲為A、B、C三種質(zhì)粒，圖乙為含有目的基因D的DNA片段，圖丙為重組載體的示意圖。Ap為氨芐青霉素抗性基因，Tc為四環(huán)素抗性基因，LacZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解物質(zhì)X-gal,從而使菌落顯現(xiàn)出藍色。若無該基因或該基因被破壞，則菌落呈白色。，EcoRI（0.6Kb）、PvuI（0.8Kb）為限制酶及其切割位點與復(fù)制原點之間的距離?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程操作的核心步驟是 基因表達載體的構(gòu)建基因表達載體的構(gòu)建。圖甲中三種質(zhì)粒適宜作為運載體的是質(zhì)粒 BB。
（2）獲取目的基因D時應(yīng)選擇乙圖中的 PvuⅠPvuⅠ對其所在的DNA進行切割。
（3）將目的基因D和甲圖中相應(yīng)質(zhì)粒連接后，得到圖丙中三種方式。為選出正向連接的重組質(zhì)粒，使用 EcoRⅠEcoRⅠ對質(zhì)粒完全酶切后，進行電泳分析。若是正向連接載體，電泳圖譜中出現(xiàn)長度為 1.21.2Kb和 5.55.5Kb兩條帶。
（4）利用自身不含lacZ基因且對抗生素敏感的大腸桿菌作為受體細胞，要在已轉(zhuǎn)化的含重組質(zhì)粒、已轉(zhuǎn)化的含空質(zhì)粒的受體細胞和未轉(zhuǎn)化成功的細胞中篩選出已轉(zhuǎn)化的含重組質(zhì)粒的受體細胞的方法是在含有 氨芐青霉素氨芐青霉素和 X-galX-gal的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，形成 白色白色（填“藍色”或“白色”）菌落的為導(dǎo)入重組質(zhì)粒的受體細胞。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】基因表達載體的構(gòu)建；B；PvuⅠ；EcoRⅠ；1.2；5.5；氨芐青霉素；X-gal；白色
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/4/20 14:35:0組卷：3引用：1難度：0.7
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（1）獲得轉(zhuǎn)基因抗鹽煙草新品種過程中應(yīng)用的生物技術(shù)有（答出2項）等。
（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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