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單克隆抗體以其特異性強、靈敏度高等優(yōu)點,得到了廣泛的應用,尤其是在臨床上的使用,解決了很多疾病的診斷和治療難題。在制備過程中,需要經過多次篩選才能獲得滿足需要的雜交瘤細胞。請回答下列問題:
(1)制備單克隆抗體的過程中用到的細胞工程技術有
動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合
動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合
。
(2)將鼠的骨髓瘤細胞與脾臟中的淋巴細胞融合,得到多種細胞,再用特定的選擇培養(yǎng)基可篩選得到雜交瘤細胞。已知細胞合成DNA有D和S兩條途徑,其中D途徑能被氨基蝶呤阻斷。鼠淋巴細胞中有這兩種DNA的合成途徑,但一般不分裂增殖。鼠骨髓瘤細胞中盡管沒有S途徑,但能不斷分裂增殖。根據上述原理,設計實驗從培養(yǎng)基中篩選出雜交瘤細胞:
在正常的動物細胞培養(yǎng)液中加入適量氨基蝶呤,培養(yǎng)融合細胞一段時間,其它條件相同且適宜。最后存活下來的且能增殖的細胞就是雜交瘤細胞
在正常的動物細胞培養(yǎng)液中加入適量氨基蝶呤,培養(yǎng)融合細胞一段時間,其它條件相同且適宜。最后存活下來的且能增殖的細胞就是雜交瘤細胞
。被篩選淘汰的細胞有
未融合的親本細胞以及融合的具有同種核的細胞
未融合的親本細胞以及融合的具有同種核的細胞

(3)將上述篩選得到的雜交瘤細胞放在多孔培養(yǎng)板上進行培養(yǎng),吸取細胞培養(yǎng)孔中的
上清液
上清液
(填“上清液”或“沉淀細胞”),利用
抗原—抗體雜交
抗原—抗體雜交
技術進行抗體檢測,從中選擇
專一抗體檢驗陽性
專一抗體檢驗陽性
的雜交瘤細胞,經過稀釋、檢驗、克隆化培養(yǎng),最終獲得理想的單克隆抗體。
(4)上述兩次篩選獲得的雜交瘤細胞的區(qū)別是
經選擇性培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細胞具有多種類型,能產生多種抗體;經抗體檢驗呈陽性的雜交瘤細胞,可產生專一抗體
經選擇性培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細胞具有多種類型,能產生多種抗體;經抗體檢驗呈陽性的雜交瘤細胞,可產生專一抗體
。

【答案】動物細胞培養(yǎng)、動物細胞融合;在正常的動物細胞培養(yǎng)液中加入適量氨基蝶呤,培養(yǎng)融合細胞一段時間,其它條件相同且適宜。最后存活下來的且能增殖的細胞就是雜交瘤細胞;未融合的親本細胞以及融合的具有同種核的細胞;上清液;抗原—抗體雜交;專一抗體檢驗陽性;經選擇性培養(yǎng)基獲得的雜交瘤細胞具有多種類型,能產生多種抗體;經抗體檢驗呈陽性的雜交瘤細胞,可產生專一抗體
【解答】
【點評】
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發(fā)布:2024/4/20 14:35:0組卷:14引用:2難度:0.7
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  • 1.CD47是一種跨膜糖蛋白,它可與巨噬細胞表面的信號調節(jié)蛋白結合,從而抑制巨噬細胞的吞噬作用。肺癌、結腸癌等多種腫瘤細胞表面的CD47含量比正常細胞高1.6~5倍,導致吞噬細胞對腫瘤細胞的清除效果減弱??茖W家推測,抗CD47的單克隆抗體可以解除CD47對巨噬細胞的抑制作用,為此他們按照如圖流程進行了實驗。下列敘述正確的是( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:7引用:3難度:0.6
  • 2.雙特異性抗體是指一個抗體分子可以與兩個不同抗原或同一抗原的兩個不同抗原表位相結合,目前最常利用雜交瘤雜交法來制備。長春花是原產于非洲東海岸的野生花卉,其所含的長春堿具有良好的抗腫瘤作用。圖1是某雙特異性抗體作用圖。圖2是科研人員通過雜交—雜交瘤細胞技術(免疫的B淋巴細胞和雜交瘤細胞雜交技術)生產能同時識別癌胚抗原和長春堿的雙特異性單克隆抗體的部分過程。請分析回答下列問題:

    (1)與植物體細胞雜交相比,圖2中過程②特有的誘導融合的方法是 
     
    ,過程②選用的骨髓瘤細胞 
     
    (選填“能”或“不能”)在HAT培養(yǎng)基上生長。
    (2)對③篩選出的雜交瘤細胞,還需進行
     
     
    ,才能篩選出足夠量的既能無限增殖又能產生特異性抗體的雜交瘤細胞。與傳統(tǒng)血清抗體相比,單克隆抗體最主要的優(yōu)點是
     
    (答出一點)。
    (3)圖2中①步驟注射癌胚抗原的目的是
     
    。圖2方框內需要經過
     
    次篩選,才能獲取單克隆雜交—雜交瘤細胞。體外培養(yǎng)到一定時期的單克隆雜交—雜交瘤細胞會因為
     
    、有害代謝物的積累和培養(yǎng)液中營養(yǎng)物質缺乏等因素而分裂受阻,需進行傳代培養(yǎng)。
    (4)與直接使用長春堿相比,將長春堿與雙特異性單克隆抗體結合后給藥,對人體的副作用更小,原因是
     
    。

    發(fā)布:2024/12/31 1:30:1組卷:21引用:4難度:0.5
  • 3.使用高效的細胞毒素藥物進行化療可以有效殺傷腫瘤細胞但細胞毒素沒有特異性,在殺傷腫瘤細胞的同時還會對健康細胞造成傷害。這限制了它在臨床上的應用。抗體一藥物偶聯(lián)物(ADC)通過將細胞毒素與能特異性識別腫瘤抗原的單克隆抗體結合,實現了對腫瘤細胞的選擇性殺傷ADC通常由抗體、接頭和藥物(如細胞毒素)三部分組成,它的作用機制如圖所示。下列敘述正確的是( ?。?br />

    發(fā)布:2024/12/31 3:30:1組卷:18引用:2難度:0.7
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