當(dāng)前位置： 2022-2023學(xué)年陜西省寶雞市渭濱區(qū)高二（下）期末生物試卷> 試題詳情

關(guān)于限制酶的說法中，正確的是（　?。?/h1>

A．限制酶是一種酶，只識別GAATTC堿基序列

B．限制酶一般不切割自身的DNA分子，只切割外源DNA

C．EcoRⅠ切割的是G-A之間的氫鍵

D．限制酶只存在于原核生物中

【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．

【答案】B

【解答】

【點(diǎn)評】

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發(fā)布：2024/6/21 8:0:10組卷：14引用：2難度：0.8

相似題

1．RNA沉默是雙鏈RNA被特異性的核酸酶降解，產(chǎn)生小干擾RNA（siRNA），這些siRNA與同源的靶RNA互補(bǔ)結(jié)合，特異降解靶RNA，從而抑制基因表達(dá)。棉蚜是棉花的主要害蟲，嚴(yán)重危害棉花的生產(chǎn)。E基因是棉蚜生長發(fā)育的重要基因，為了控制棉蚜對棉花的危害，科研人員通過轉(zhuǎn)基因技術(shù)，在棉花中表達(dá)棉蚜E基因的雙鏈RNA（dsRNA），特異性抑制棉蚜內(nèi)源E基因的表達(dá)。如圖是主要流程，請回答：

限制酶識別序列和切點(diǎn)

EcoRⅠ G↓AATTC

KpnⅠ G↓GTACC

BamHⅠ G↓GATCC

XbaⅠ T↓CTAGA

（1）根據(jù)PCR1反應(yīng)體系中加入的引物1和2推測PCR2中加入的引物為

。
A．5'-AAATCTAGAAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
B．5'-AAATCTAGACTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
C．5'-AAAGGATCCAGCGACTCAAGATCATGGAGTAT-3'
D．5'-AAAGGATCCCTGCCACTTCTTCAACTAATTCT-3'
（2）從理論上推測，PCR1第五輪循環(huán)產(chǎn)物中含有引物1的DNA片段所占的比例為

。圖中正義序列和反義序列中堿基排列順序

（填“大多數(shù)相同”或“大多數(shù)不同”或“相同”或“不同”）。過程①需要的工具酶除限制酶外還需要

。
（3）過程②將表達(dá)載體轉(zhuǎn)化到經(jīng)

處理的農(nóng)桿菌菌株后，為了確定重組質(zhì)粒已經(jīng)成功轉(zhuǎn)化可以通過

驗(yàn)證。
（4）過程④愈傷組織形成棉花植株的過程稱為

。轉(zhuǎn)基因棉花再生植株移栽到溫室后，葉片涂抹

檢測抗性，并提取DNA進(jìn)行PCR分析。
（5）科研人員采用特定的方法大量提取成功轉(zhuǎn)化的4株棉花植株葉片的基因組DNA，用HindⅢ完全消化，消化產(chǎn)物經(jīng)電泳、轉(zhuǎn)膜后與目的基因的探針雜交，其雜交帶結(jié)果如圖2所示（圖中數(shù)字2～5代表轉(zhuǎn)化成功的植株，數(shù)字1代表對照組）。下列有關(guān)分析正確的有

。
①對照組可以用非轉(zhuǎn)基因棉花的基因組DNA進(jìn)行實(shí)驗(yàn)
②數(shù)字3所代表的植株中目的基因插入染色中的兩個不同位置
③選擇HindⅢ進(jìn)行消化的原因是基因組DNA中一般只有1～2切點(diǎn)
④相同位置上雜交帶對應(yīng)DNA片段的脫氧核苷酸序列相同
（6）科研人員進(jìn)一步鑒定上述4號泳道對應(yīng)的植株，確定獲得一株轉(zhuǎn)基因抗性植株CZ4，CZ4連續(xù)自交兩代，則F₂中抗性植株占比為

。

發(fā)布：2024/10/17 17:0:4組卷：12引用：1難度：0.4

解析

2．某研究小組利用水稻細(xì)胞培育能產(chǎn)生HPV（人乳頭瘤病毒）-L1蛋白的水稻胚乳細(xì)胞生物反應(yīng)器，為獲得HPV-L1蛋白提供一種新的高效、低廉的途徑，用于制備HPV疫苗。其基本流程包括表達(dá)載體的構(gòu)建、農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化、水稻細(xì)胞轉(zhuǎn)化、轉(zhuǎn)基因植株的篩選等步驟，最終獲得能產(chǎn)生含HPV-L1蛋白胚乳細(xì)胞的轉(zhuǎn)基因水稻。回答下列問題：
（1）PCR是獲取HPV-L1基因的一種方法，PCR反應(yīng)體系設(shè)計(jì)的兩種引物，在引物間和引物內(nèi)的堿基都不能互補(bǔ)，其原因是

。
（2）農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化：科研人員構(gòu)建了如圖所示的表達(dá)載體，將其與經(jīng)過Ca²⁺處理后的農(nóng)桿菌細(xì)胞混合，隨后將菌液涂布在含

的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，挑取菌落進(jìn)行PCR鑒定后再擴(kuò)大培養(yǎng)待用。
（3）水稻細(xì)胞轉(zhuǎn)化：取水稻離體組織置于誘導(dǎo)培養(yǎng)基啟動子潮霉素啟動子抗性基因中發(fā)生

過程形成愈傷組織。挑取生長良好的愈傷組織加入到（2）中得到的菌液中共培養(yǎng)，完成轉(zhuǎn)化過程。
（4）轉(zhuǎn)基因水稻的篩選：將轉(zhuǎn)化處理后的水稻愈傷組織放在含

（抗生素）的培養(yǎng)基中選擇培養(yǎng)，并誘導(dǎo)出轉(zhuǎn)基因水稻。
（5）水稻胚乳生物反應(yīng)器具有提取和處理產(chǎn)物簡易、生產(chǎn)成本低和生物安全性高等特點(diǎn)，從而被廣泛應(yīng)用。請?jiān)诜肿铀缴咸岢鰞蓚€提高水稻胚乳生物反應(yīng)器產(chǎn)物產(chǎn)量的思路：

。
發(fā)布：2024/10/25 0:0:1組卷：5引用：1難度：0.5
解析
3．α-淀粉酶被廣泛應(yīng)用于生產(chǎn)過程中。為獲得催化活性高的α-淀粉酶，科研人員利用細(xì)菌進(jìn)行改造。
（1）α-淀粉酶能將

水解為低聚糖和單糖，其催化活性高低往往取決于該酶活性中心的

結(jié)構(gòu)。
（2）科研人員提取枯草芽孢桿菌的表達(dá)載體，插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)以及氨芐青霉素抗性基因，構(gòu)建如圖所示重組穿梭載體。
①根據(jù)α-淀粉酶活性中心的氨基酸序列，通過

工程得到α-淀粉酶突變基因。
②構(gòu)建圖中所示重組穿梭載體需要的酶是

。插入大腸桿菌復(fù)制原點(diǎn)的目的是

。
③將含有α-淀粉酶突變基因的重組穿梭載體導(dǎo)入

的大腸桿菌細(xì)胞中。將大腸桿菌菌液涂布于含

的選擇培養(yǎng)基上，待長出菌落后，用PCR方法檢驗(yàn)成功轉(zhuǎn)化的細(xì)胞。
（3）培養(yǎng)轉(zhuǎn)化成功的大腸桿菌并從中提取重組穿梭載體，導(dǎo)入枯草芽孢桿菌。將培養(yǎng)得到的枯草桿菌菌液涂布于含淀粉的培養(yǎng)基上，一段時(shí)間后選擇

的菌落，從中可篩選得到催化活性較高的α-淀粉酶。
（4）請舉一例說明本實(shí)驗(yàn)獲得的催化活性高的α-淀粉酶在生產(chǎn)中的應(yīng)用價(jià)值：

。
發(fā)布：2024/10/25 17:0:1組卷：13引用：1難度：0.6
解析

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限制酶	識別序列和切點(diǎn)
EcoRⅠ	G↓AATTC
KpnⅠ	G↓GTACC
BamHⅠ	G↓GATCC
XbaⅠ	T↓CTAGA

關(guān)于限制酶的說法中，正確的是（ ?。?/h1>

關(guān)于限制酶的說法中，正確的是（　?。?/h1>