當前位置： 2022年廣東省汕頭市高考生物模擬試卷> 試題詳情

心腦血管疾病引發(fā)的血栓并發(fā)癥嚴重威脅人類生命，居各種疾病死亡率首位。臨床上常用組織型纖溶酶原激活劑作為溶解血栓、搶救心肌梗死患者的特效藥。然而，t-PA因注射劑量大容易誘發(fā)顱內出血，為了提高t-PA臨床應用的可行性，科學家研發(fā)了一種顱內出血傾向大幅度降低的優(yōu)質t-PA突變蛋白。據(jù)此回答下列問題：

（1）人t-PA由527個氨基酸構成（如下圖所示），基礎研究顯示，將t-PA第84位的半胱氨酸替換為絲氨酸，所形成的突變蛋白溶解血栓有效性明顯提高。對t-PA的改造必須通過
基因修飾（或基因合成）
基因修飾（或基因合成）
獲得t-PA突變基因而不是直接改造蛋白質。
（2）t-PA突變基因最終需要與P質粒重組才能構建基因表達載體。P質粒DNA分子上有①復制原點，可以保證B質粒在受體細胞中能
自我復制
自我復制
；②多個限制酶切位點，便于
目的基因（外源DNA）的插入
目的基因（外源DNA）的插入
；③標記基因和相關的啟動子。
（3）基因表達載體進入受體細胞中并在細胞內維持穩(wěn)定和表達的過程稱為
轉化
轉化
。
（4）為檢測t-PA基因是否導入受體細胞，可采用
DNA分子雜交
DNA分子雜交
進行檢測。除此之外，還可以使用PCR技術，實驗組以待測樣本DNA為模板，使用引物1：5′-TACCAAGTGATCTGCAGA-3′、引物2：
5’-TCGCATGTTGTGACGAAT-3’
5’-TCGCATGTTGTGACGAAT-3’
（填引物的核苷酸序列）進行PCR擴增；同時以
以t-PA突變基因片段為模板
以t-PA突變基因片段為模板
模板的組別作為陰性對照組。若
實驗組與陽性對照組的結果一致，且陰性對照組無擴增產物
實驗組與陽性對照組的結果一致，且陰性對照組無擴增產物
，說明目的基因導入成功。

【考點】基因工程的操作過程綜合．

【答案】基因修飾（或基因合成）；自我復制；目的基因（外源DNA）的插入；轉化；DNA分子雜交；5’-TCGCATGTTGTGACGAAT-3’；以t-PA突變基因片段為模板；實驗組與陽性對照組的結果一致，且陰性對照組無擴增產物

【解答】

【點評】

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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：6引用：1難度：0.6

相似題

1．某科研小組從土壤菌株A、B中分離到同源性為93%的Bt1抗蟲基因和Bt2抗蟲基因的編碼序列，并運用交錯延伸PCR技術獲得了抗蟲性能強的重組B基因，轉入煙草獲得成功，過程如圖所示。下列選項正確的是（　?。?br />
注：①交錯延伸PCR：基因Bt1和Bt2均作為模板，所需引物相同，圖中僅示其中一條鏈的延伸情況。②啟動子Pr1a可在煙草葉肉細胞中特異性啟動基因的轉錄。③圖中生長素合成酶基因是通過成熟mRNA逆轉錄獲得的DNA片段，可使植物細胞合成生長素。

A．若用EcoRⅠ（5'-G↓AATTC-3'）和限制酶XmaⅠ（5'-G↓CCGGG-3'）雙酶切多個目的基因，能避免兩個目的基因連接成環(huán)

B．復制原點是RNA聚合酶識別和結合的位點

C．在培養(yǎng)愈傷組織的培養(yǎng)基中添加卡那霉素可以篩選含有Bt重組基因的細胞

D．圖中生長素合成酶基因不能促進愈傷組織生根

發(fā)布：2024/11/16 21:0:1組卷：36引用：2難度：0.5

解析

2．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />

A．若某基因是從人的細胞內提取mRNA經(jīng)逆轉錄形成的，則該基因中不含啟動子序列

B．擴增目的基因時，利用耐高溫的DNA連接酶從引物a、b的3′-端進行子鏈合成

C．導入人血清白蛋白基因的綿羊受體細胞是乳腺細胞

D．利用農桿菌轉化法可將含有目的基因的重組質粒整合到植物受體細胞的染色體DNA上

發(fā)布：2024/11/14 7:0:1組卷：62引用：7難度：0.7

解析

3．經(jīng)由食物攝取過量生物胺會引起頭痛、胃腸道不適和過敏等不良反應，嚴重時甚至危及生命，因此必須對食品中生物胺的含量進行減控。微生物來源的多銅氧化酶（MCO）能高效分解生物胺，基于基因工程規(guī)?；a重組MCO在食品工業(yè)中具有廣泛用途。我國科研人員采用PCR技術獲得發(fā)酵乳桿菌的MCO基因，然后轉入大腸桿菌中實現(xiàn)了高效表達。
（1）通過上述基因工程技術獲取目標產物，涉及如下步驟，則合理的操作步驟排序是

（填寫下列編號）。
①篩選和鑒定含目的基因的受體細胞
②選用合適的方法獲取目的基因
③借助發(fā)酵工程規(guī)?；a目標蛋白
④目的基因導入受體細胞
⑤目的基因和運載體重組構建表達載體
（2）在PCR過程中，引物的功能是

。
A．啟動DNA復制
B．規(guī)定擴增區(qū)間
C．解旋DNA雙鏈
D．充當復制模板

（3）為獲得目的基因MCO（圖甲灰色表示的序列），正確設計的PCR引物應為圖甲中的

。
（4）獲取目的基因后，需要和載體重組導入受體細胞。載體的化學本質是

（填DNA或RNA/DNA或RNA）。
（5）在常規(guī)PCR的每一輪擴增反應中，溫度隨時間的變化順序是圖乙中的

。
（6）若目的基因MCO經(jīng)限制酶切開后呈圖丙中圖2所示的末端，那么載體質粒pCLY15（圖丙中圖1）需用

和

切開，才能與MCO片段高效連接。
（7）下列實驗操作中，能有效鑒別載體質粒pCLY15空載還是“滿載”的是

。
A．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，用合適的限制酶切割
B．在選擇培養(yǎng)基中添加X-gal試劑，以克隆的顏色進行鑒別
C．從抗藥性克隆中提取質粒DNA，以此為模板進行PCR檢測
D．將Ap抗性克隆轉移至含Tc（四環(huán)素）的平板上，根據(jù)大腸桿菌生長與否加以鑒別
發(fā)布：2024/11/14 4:30:2組卷：29引用：3難度：0.5
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2．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（ ?。?br />

2．基因工程在農牧業(yè)、醫(yī)藥衛(wèi)生和食品工業(yè)等多方面的應用發(fā)展迅速，如圖表示利用基因工程技術生產人血清白蛋白的兩條途徑。下列敘述錯誤的是（　?。?br />