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人體內的t-PA蛋白能高效降解由纖維蛋白凝聚而成的血栓,是心梗和腦血栓的急救藥。通過基因工程技術可以大量制備基因工程藥物t-PA。研究表明,為心?;颊咦⑸浯罅縯-PA會誘發(fā)顱內出血,其原因在于t-PA與纖維蛋白結合的特異性不高,若將t-PA第84位的半胱氨酸換成絲氨酸,能顯著降低出血副作用。據此,先對天然的t-PA基因進行序列改造,然后再采取傳統(tǒng)的基因工程方法表達該改造后的基因,可制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白。(注:如圖表示相關的目的基因、載體及限制酶。pCLY11為質粒,新霉素為抗生素。)請回答下列問題:
菁優(yōu)網
(1)以上制造出性能優(yōu)異的改良t-PA蛋白的過程被稱為
蛋白質工程
蛋白質工程
。已知人t-PA基因第84位半胱氨酸的模板鏈堿基序列為ACA,而絲氨酸的密碼子為UCU,因此改造后的基因決定第84位絲氨酸的模板鏈的堿基序列應設計為
AGA
AGA

(2)如圖所示,需選用限制酶
XmaⅠ和BgⅡ
XmaⅠ和BgⅡ
切開質粒pCLY11,才能與t-PA改良基因高效連接。與單一酶酶切相比,本操作采用的雙酶切方法的優(yōu)點是
防止質粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質粒載體和目的基因的正確連接
防止質粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質粒載體和目的基因的正確連接
。
(3)將連接好的DNA分子導入大腸桿菌,含t-PA改良基因重組DNA分子的細胞應具有的性狀是
C
C
。
A.新霉素抗性且呈藍色
B.新霉素敏感且呈藍色
C.新霉素抗性且呈白色
D.新霉素敏感且呈白色

【答案】蛋白質工程;AGA;XmaⅠ和BgⅡ;防止質粒載體和目的基因的自身環(huán)化,保證質粒載體和目的基因的正確連接;C
【解答】
【點評】
聲明:本試題解析著作權屬菁優(yōu)網所有,未經書面同意,不得復制發(fā)布。
發(fā)布:2024/5/1 8:0:8組卷:4引用:1難度:0.6
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  • 1.胰蛋白酶抑制劑(TI)可抑制昆蟲蛋白酶活性,阻礙昆蟲消化蛋白質。鹽藻是一種無細胞壁的單細胞真核綠藻,是能在高鹽條件下生長的新型生物反應器。研究人員利用基因工程技術構建TI基因的表達載體,并將其導入鹽藻細胞中,進行了一系列實驗?;卮鹣铝袉栴}:
    (1)研究人員利用PCR技術特異性地擴增目的基因的前提是需要
     
    ,以便合成引物。PCR過程中溫度的控制至關重要,將處理溫度控制在90~95℃,是為了
     
    。
    (2)獲取目的基因后,為了構建基因表達載體,還需要使用的酶是
     
    (答出2種)。構建成功的基因表達載體應含有的結構有目的基因、啟動子、
     
    (答出3種)等結構。
    (3)研究人員將TI基因導入受體細胞后進行了檢測,相關步驟和實驗結果如表所示。該檢測方法依據的原理是
     
    。據表分析,該實驗結果說明
     
    。
    組別 實驗步驟 實驗結果
    轉基因鹽藻(A組) 離心收集三組細
    胞制備可溶性蛋
    白質樣品
    將TI注射到大白
    兔體內,獲取TI
    抗體
    讓TI抗體和樣品
    進行混合檢測
    有雜交帶
    非轉基因鹽藻(B組) 無雜交帶
    陽性對照組(C組) 有雜交帶

    發(fā)布:2024/11/3 15:30:2組卷:5引用:4難度:0.7
  • 菁優(yōu)網2.圖示PIJ702是一種常用質粒,其中tar為硫鏈絲菌素(一種抗生素)抗性基因;mel為黑色素合成基因,其表達能使白色的鏈霉菌菌落變成黑色菌落;而三種限制酶SacⅠ、SphⅠ、BglⅡ在pIJ702上分別只有一處識別序列?;卮鹣铝袉栴}。
    表1
    pU702pZHZ8
    BglI5.7kb6.7kb
    表2
    固體培養(yǎng)基中硫鏈絲菌素濃度(ug/mL) 0 1 2 5 10
    不含質粒的鏈霉菌生長狀況 +++++ +++ + - -
    +表示生長;-表示不生長。
    (1)限制性核酸內切酶可以識別雙鏈DNA中特定核苷酸序列,并使每條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的
     
    斷裂,切割形成的末端有
     
    兩種。
    (2)以SacⅠ和SphⅠ切取目的基因,與質粒pIJ702上長度為0.4kb的SacⅠ/SphⅠ片段進行置換,構建重組質粒pZHZ8。上述兩種質粒經限制酶BglⅡ酶切后所得片段長度見表1。由此判斷目的基因的片段長度為
     
    kb,判定目的基因中含有一個BglⅡ切割位點的理由是
     
    。
    (3)導入目的基因時,首先用Ca2+處理鏈霉菌使其成為感受態(tài)細胞,再將重組質粒pZHZ8溶于緩沖液中與感受態(tài)細胞混合,在一定的溫度下可以促進鏈霉菌完成
     
    過程。
    (4)不含質粒的鏈霉菌在含硫鏈絲菌素的固體培養(yǎng)基上生長狀況如表2所示。若要篩選導入pZHZ8的鏈霉菌細胞,所需硫鏈絲菌素濃度至少應在
     
    μg/mL以上,挑選成功導入pZHZ8的鏈霉菌的具體方法是
     
    。若要檢測整合到染色體DNA上的目的基因是否發(fā)揮功能作用,第一步需檢測受體細胞的
     
    (填“DNA”或“RNA”),檢測方法應采用
     
    技術。

    發(fā)布:2024/11/5 22:30:2組卷:21引用:3難度:0.6
  • 3.我國科學家利用蘇云金桿菌中的Bt基因培育出轉基因抗蟲棉,下列說法錯誤的是( ?。?/h2>

    發(fā)布:2024/11/4 19:0:2組卷:1引用:1難度:0.7
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