科研人員利用胚胎干細(xì)胞（ES細(xì)胞）對(duì)干擾素基因缺失小鼠進(jìn)行基因治療。其技術(shù)流程如圖1：

（1）步驟①的技術(shù)名稱是

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)

動(dòng)物體細(xì)胞核移植技術(shù)

。
（2）將基因?qū)隕S細(xì)胞而不是導(dǎo)入到上皮細(xì)胞是因?yàn)镋S細(xì)胞具有

發(fā)育的全能性

發(fā)育的全能性

。
（3）步驟③中，需要構(gòu)建含有干擾素基因的

基因表達(dá)載體

基因表達(dá)載體

，對(duì)干擾素基因片段和質(zhì)粒進(jìn)行酶切時(shí)，可選用的限制酶組合為

HindⅢ和PstⅠ

HindⅢ和PstⅠ

或

EcoRⅠ和PstⅠ

EcoRⅠ和PstⅠ

。
（4）為了得到實(shí)驗(yàn)所需的大量干擾素基因，研究人員利用PCR 技術(shù)進(jìn)行擴(kuò)增。由于DNA復(fù)制時(shí)，子鏈只能由5′向3′方向延伸，因此可以從圖2A、B、C、D四種單鏈DNA片段中選取

B和C

B和C

作為引物。若要將1個(gè)干擾素基因復(fù)制10 次，則需要在緩沖液中至少加入

2¹¹-2

2¹¹-2

個(gè)引物。

（5）將步驟③獲得的ES細(xì)胞在熒光顯微鏡下觀察，選擇發(fā)

綠

綠

色熒光的細(xì)胞進(jìn)行體外誘導(dǎo)。為檢測(cè)干擾素基因是否表達(dá)，可以采用

抗原-抗體雜交

抗原-抗體雜交

的方法。