基因工程是花卉培養(yǎng)中的一種重要技術手段,這能夠培養(yǎng)出不少新品種的花卉。下圖為利用矮牽?;ㄖ芯幋a3,5-羥氧化酶的基因(HE)改造玫瑰,培育能夠產(chǎn)生藍色花冠玫瑰的新品種時的技術流程圖。圖中Tcr、Apr、NPTⅡ分別表示四環(huán)素抗性基因、氨芐青霉素抗性基因、氨基糖苷類-3-磷酸轉(zhuǎn)移酶基因?;卮鹣铝袉栴}:
(1)根據(jù)圖示分析,為了便于后期篩選成功導入大分子A的農(nóng)桿菌,選擇的限制酶的種類是
SalⅠ、EcoRⅠ
SalⅠ、EcoRⅠ
。成功導入大分子A的農(nóng)桿菌在含四環(huán)素培養(yǎng)基、含氨芐青霉素培養(yǎng)基、同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存狀況應該是:能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存,但是不能在含四環(huán)素培養(yǎng)基和同時含兩種抗生素的培養(yǎng)基上生存
。
(2)構(gòu)建基因表達載體時,一般將目的基因插在啟動子和終止子之間,其中啟動子的作用是 作為RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位
作為RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位
,有了它才能驅(qū)動基因轉(zhuǎn)錄出mRNA,最終表達出人類所需蛋白質(zhì),有時為了滿足應用的需要,會在載體中人工構(gòu)建 誘導型啟動子
誘導型啟動子
。
(3)基因表達載體構(gòu)建后,利用農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法將目的基因?qū)朊倒寮毎校@利用了農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒上T-DNA 攜帶目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞并重組的特點
攜帶目的基因轉(zhuǎn)移到受體細胞并重組的特點
的特性。人們也可以通過蛋白質(zhì)工程獲得作物新品種,該工程的起點是 預期蛋白質(zhì)功能
預期蛋白質(zhì)功能
,最終通過 基因改造或基因合成
基因改造或基因合成
來完成。
(4)從矮牽?;毎蝎@得目的基因,可以通過PCR技術對其進行擴增,已知其中一段引物的序列為CCCAACTTCTCCTCCTAGAAT,能否根據(jù)該引物序列設計出另一段引物的序列?不能
不能
,原因是 引物是根據(jù)已知目的基因(S蛋白基因)的核苷酸序列設計的
引物是根據(jù)已知目的基因(S蛋白基因)的核苷酸序列設計的
。