核酸疫苗是將編碼某種抗原蛋白的外源基因（DNA或RNA片段）導(dǎo)入動(dòng)物體細(xì)胞內(nèi)，通過宿主細(xì)胞的表達(dá)系統(tǒng)合成抗原蛋白，誘導(dǎo)宿主產(chǎn)生對該抗原蛋白的免疫應(yīng)答，以達(dá)到預(yù)防或治療相應(yīng)疾病的一類新型疫苗。研究表明核酸疫苗不僅具有良好的免疫原性與安全性，且由于核酸更易于修飾與改造，較以往蛋白疫苗具有更大的靈活性和更廣闊的應(yīng)用前景。請回答：

（1）研發(fā)DNA疫苗時(shí)，構(gòu)建含有病原體抗原基因表達(dá)載體的過程中需要用到的工具酶有

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶

限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶

。
（2）圖1中所用的載體是

質(zhì)粒

質(zhì)粒

，構(gòu)建基因表達(dá)載體的目的是

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

使目的基因在受體細(xì)胞中穩(wěn)定存在并遺傳給下一代，同時(shí)使目的基因能夠表達(dá)和發(fā)揮作用

，基因表達(dá)載體中，驅(qū)動(dòng)病原體抗原基因轉(zhuǎn)錄的結(jié)構(gòu)為

啟動(dòng)子

啟動(dòng)子

。將該DNA疫苗導(dǎo)入受體細(xì)胞的方法是肌肉注射法或

基因槍法（微彈轟擊法）

基因槍法（微彈轟擊法）

。
（3）mRNA疫苗可以由計(jì)算機(jī)設(shè)計(jì)、制造并通過高速機(jī)器大批量生產(chǎn)。目前用于制造疫苗的RNA有兩種，非復(fù)制型mRNA和自我擴(kuò)增型mRNA，從圖2中可以看出自我擴(kuò)增型mRNA的優(yōu)點(diǎn)是可在細(xì)胞內(nèi)

大量復(fù)制，提高蛋白質(zhì)合成效率

大量復(fù)制，提高蛋白質(zhì)合成效率

。mRNA常被包裹在脂質(zhì)體顆粒中注射到相關(guān)人員的手臂肌肉，脂質(zhì)體顆粒的作用是

保護(hù)mRNA，防止被酶降解

保護(hù)mRNA，防止被酶降解

。
（4）病毒核酸檢測試劑盒通常以病毒獨(dú)特的基因序列為檢測靶標(biāo)。PCR擴(kuò)增時(shí)每一個(gè)循環(huán)分為

變性、復(fù)性、延伸

變性、復(fù)性、延伸

三步，使靶標(biāo)DNA序列呈指數(shù)增加。每一個(gè)擴(kuò)增出來的DNA序列都與預(yù)先加入的一段熒光標(biāo)記

探針

探針

結(jié)合，產(chǎn)生熒光信號，擴(kuò)增出來的靶標(biāo)DNA序列越多，累積的熒光信號就越強(qiáng)。在沒有病毒的樣本中，因?yàn)闆]有靶標(biāo)DNA序列擴(kuò)增，所以就檢測不到熒光信號增強(qiáng)。