如圖為利用基因工程生產(chǎn)乙肝疫苗的過程，質(zhì)粒上箭頭所指部位為相應(yīng)的限制酶切割位點。質(zhì)粒中l(wèi)acZ基因編碼產(chǎn)生的酶可以分解培養(yǎng)基中的XgaⅠ，產(chǎn)生藍色物質(zhì)，使菌落呈現(xiàn)藍色，否則菌落為白色?；卮鹣铝袉栴}：
（1）利用PCR技術(shù)擴增目的基因時需要的酶為 耐高溫DNA 聚合酶耐高溫DNA 聚合酶；此過程還需要引物，其作用是 使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸，若將1個目的基因擴增n次，則需要引物 2（2n-1）2（2n-1）個。
（2）①過程為了防止目的基因與質(zhì)粒任意連接，應(yīng)選擇 EcoR I、BamH IEcoR I、BamH I限制酶分別切割目的基因和質(zhì)粒，并將切割后的質(zhì)粒和目的基因用 DNA連接DNA連接酶連接形成重組質(zhì)粒，該重組質(zhì)粒除了含有目的基因和標記基因外，還應(yīng)含有 啟動子、終止子啟動子、終止子（寫出2點）等結(jié)構(gòu)。
（3）過程②一般用 Ca2+Ca2+處理大腸桿菌。為了篩選成功導入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可將大腸桿菌接種到含有 X-gal和青霉素X-gal和青霉素的固體培養(yǎng)基上，挑選顏色為 白色白色（填“藍色”或“白色”）的菌落進一步培養(yǎng)。
（4）除圖示方法外，還可利用乳腺生物反應(yīng)器生產(chǎn)乙肝疫苗，該過程需要將目的基因與 乳腺中特異表達的基因乳腺中特異表達的基因啟動子相連，并通過 顯微注射顯微注射方法將重組質(zhì)粒導入到動物的受精卵中，由這個受精卵發(fā)育成的轉(zhuǎn)基因動物進入泌乳期后，通過分泌乳汁即可獲得乙肝抗原蛋白。
【考點】基因工程的操作過程綜合．
【答案】耐高溫DNA 聚合酶；使DNA聚合酶能夠從引物的3'端開始連接脫氧核苷酸；2（2n-1）；EcoR I、BamH I；DNA連接；啟動子、終止子；Ca2+；X-gal和青霉素；白色；乳腺中特異表達的基因；顯微注射
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/7/25 8:0:9組卷：4引用：1難度：0.6
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（2）為確保目的基因定向插入了質(zhì)粒，應(yīng)該選擇（填酶）切割目的基因和質(zhì)粒。在培養(yǎng)基中加入（填“氨芐青霉素”或“四環(huán)素”）對目的基因進行篩選。
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限制酶 BamHⅠ EcoRⅠ HindⅠ NbeⅠ MunⅠ 識別序列及切割位點 G↓CATCC G↓AATTC A↓AGCTT G↓CTAGC C↓AATTG 
發(fā)布：2024/12/20 3:30:1組卷：6引用：1難度：0.6
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