科研人員培育了一種能夠降解餐廚廢棄物并生成乳酸的轉基因畢赤酵母?；舅悸肥窃谌樗崦摎涿富颍↙DH）的單基因表達載體中逐個接入糖化酶基因（Ga）表達盒與α-淀粉酶基因（Amy）表達盒，構建出AGL—三基因表達載體，如圖1所示。
（1）利用PCR技術獲得目的基因的過程中，需要在PCR反應體系中加入模板、Taq酶及 引物和四種游離的脫氧核苷酸引物和四種游離的脫氧核苷酸。
（2）將圖1所示結構“導入”畢赤酵母后，將畢赤酵母轉移至含 博來霉素博來霉素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)，篩選出能夠生存的菌落。
（3）對篩選出的菌株進行個體水平鑒定的方法是 將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量，利用轉基因畢赤酵母降解餐廚廢棄物生成乳酸，優(yōu)點有 既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產成本既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產成本。
（4）構建三基因表達載體的難點在于構建目的基因的表達盒，圖2為Amy表達盒的構建過程。（pro為啟動子；AOX TT為終止子；Bsp119Ⅰ、XbaⅠ、BglⅡ、BamHⅠ為不同限制酶，①②為操作過程。）操作①的處理是 將質粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理將質粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理，然后用DNA連接酶拼接。在此之前，科研人員還利用點突變技術對α-淀粉酶基因序列進行了同義密碼子替換（即不影響氨基酸序列）改造，推測其原因是 α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列。操作②中必需用 BglⅡ、BamHⅠBglⅡ、BamHⅠ酶對質粒2處理，才能獲得能正常表達的α-淀粉酶基因表達盒。
【考點】基因工程的操作過程綜合；DNA片段的擴增與電泳鑒定．
【答案】引物和四種游離的脫氧核苷酸；博來霉素；將其接種至餐廚廢棄物中，定時測定乳酸的含量；既減少了環(huán)境污染，也降低了乳酸的生產成本；將質粒1與α-淀粉酶基因均用Bsp119Ⅰ與XbaⅠ兩種限制酶處理；α-淀粉酶基因序列中含有所用限制酶的識別序列；BglⅡ、BamHⅠ
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/5/10 8:0:9組卷：24引用：3難度：0.5
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3．幾丁質是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質酶可催化幾丁質水解。通過基因工程將幾丁質酶基因轉入植物體內，可增強其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫中獲得?；蛭膸彀?和。
（2）生物體細胞內的DNA復制開始時，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術擴增目的基因時，使反應體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個解鏈過程的共同點是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當幾丁質酶基因和質粒載體連接時，DNA連接酶催化形成的化學鍵是。
（4）提取RNA時，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉基因植株（幾丁質酶基因已經整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6