人呼吸道合胞病毒(HRSV)是一種單鏈RNA病毒,圖1是構(gòu)建人呼吸道合胞病毒基因組載體的示意圖,如表是相關(guān)限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn),請(qǐng)回答:

限制酶 | BclⅠ | EcoRⅠ | XbaⅠ | Sau3AⅠ | BamHⅠ |
識(shí)別序列及切割位點(diǎn) | T↓GATCA | G↓AATTC | T↓CTAGA | ↓GATC | G↓GATCC |
RNA聚合酶
RNA聚合酶
的催化下合成+RNA。(2)過程②設(shè)計(jì)引物時(shí)在兩種引物的5′端分別添加
Xba I和BamH I
Xba I和BamH I
酶的識(shí)別序列。過程③需要用 Xba I和 Bcl I
Xba I和 Bcl I
酶切割質(zhì)粒A。(3)過程④將質(zhì)粒B導(dǎo)入大腸桿菌,有利于
質(zhì)粒B準(zhǔn)確復(fù)制,穩(wěn)定保存,方便提取
質(zhì)粒B準(zhǔn)確復(fù)制,穩(wěn)定保存,方便提取
,需要用 CaCl2(Ca2+)
CaCl2(Ca2+)
處理大腸桿菌。(4)為制備減毒突變株,科研人員將單個(gè)突變堿基引入HRSV基因組cDNA質(zhì)??寺≈?,流程如圖2。已知在細(xì)菌體內(nèi)合成的DNA分子有甲基化修飾,通過PCR擴(kuò)增的DNA鏈無甲基化修飾。
①DpnⅠ識(shí)別甲基化的GATC四個(gè)堿基序列,因此其能將
a、b鏈
a、b鏈
水解消化掉。在大腸桿菌細(xì)胞內(nèi)完成缺刻修復(fù)需要 DNA連接
DNA連接
酶。②已知質(zhì)粒B為a個(gè),經(jīng)過程①擴(kuò)增15個(gè)循環(huán),需要突變引物
15a
15a
個(gè),將過程②形成的產(chǎn)物全部轉(zhuǎn)入大腸桿菌后復(fù)制n輪,得到雙鏈突變的DNA 15a?2n-1
15a?2n-1
個(gè)。【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合.
【答案】RNA聚合酶;Xba I和BamH I;Xba I和 Bcl I;質(zhì)粒B準(zhǔn)確復(fù)制,穩(wěn)定保存,方便提取;CaCl2(Ca2+);a、b鏈;DNA連接;15a;15a?2n-1
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:15引用:1難度:0.6
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1.下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是( ?。?/h2>
A.DNA連接酶具有特異性,只能連接同一種限制性核酸內(nèi)切酶切割形成的黏性末端 B.若能在植物細(xì)胞中檢測(cè)到相應(yīng)的目的基因,則說明基因工程項(xiàng)目獲得成功 C.蛋白質(zhì)工程需構(gòu)建基因表達(dá)載體,改造后的蛋白質(zhì)的性狀可遺傳給后代 D.將抗蟲基因整合到某植物的線粒體DNA中,可通過花粉傳播,從而引起基因污染 發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:6引用:1難度:0.7 -
2.幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分,幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi),可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?;卮鹣铝袉栴}:
(1)基因工程中所用的目的基因可以人工合成,也可以從基因文庫(kù)中獲得?;蛭膸?kù)包括
(2)生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí),解開DNA雙鏈的酶是
(3)DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來的酶,常見的有
(4)提取RNA時(shí),提取液中需添加RNA酶抑制劑,其目的是
(5)若獲得的轉(zhuǎn)基因植株(幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中)抗真菌病的能力沒有提高,根據(jù)中心法則分析,其可能的原因是發(fā)布:2025/1/5 8:0:1組卷:2引用:2難度:0.6 -
3.下列有關(guān)基因工程的敘述,正確的是( )
A.質(zhì)粒上標(biāo)記基因的作用是便于重組DNA分子的篩選 B.目的基因必須整合到受體細(xì)胞的DNA中才能復(fù)制 C.構(gòu)建表達(dá)載體時(shí)需要在目的基因前加上起始密碼子 D.誘變育種和基因工程的原理相同 發(fā)布:2024/12/31 5:0:5組卷:3引用:2難度:0.7
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