編碼蛋白甲的DNA序列(序列甲)由A、B、C、D、E五個片段組成,編碼蛋白乙和丙的序列由序列甲的部分片段組成,如圖1所示.
回答下列問題:
(1)現(xiàn)要通過基因工程的方法獲得蛋白乙,若在啟動子的下游直接接上編碼蛋白乙的DNA序列(TTCGCTTCT…CAGGAAGGA),則所構(gòu)建的表達載體轉(zhuǎn)入宿主細胞后不能翻譯出蛋白乙,原因是 編碼蛋白乙的DNA序列首端無ATG,其轉(zhuǎn)錄的mRNA中無起始密碼子AUG編碼蛋白乙的DNA序列首端無ATG,其轉(zhuǎn)錄的mRNA中無起始密碼子AUG。
(2)某同學在用PCR技術(shù)獲取DNA片段B或D的過程中,在PCR反應體系中加入了DNA聚合酶、引物等,還加入了序列甲作為 模板DNA模板DNA,加入了 4種脫氧核苷酸4種脫氧核苷酸作為合成DNA的原料。
(3)現(xiàn)通過基因工程方法獲得了甲、乙、丙三種蛋白,要鑒定這三種蛋白是否具有刺激T淋巴細胞增殖的作用,某同學做了如下實驗:將一定量的含T淋巴細胞的培養(yǎng)液平均分成四組,其中三組分別加入等量的蛋白甲、乙、丙,另一組作為對照,培養(yǎng)并定期檢測T淋巴細胞濃度,結(jié)果如圖2。
①由圖2可知,當細胞濃度達到a時,添加蛋白乙的培養(yǎng)液中T淋巴細胞濃度不再增加,此時若要使T淋巴細胞繼續(xù)增殖,可采用的方法是 細胞培養(yǎng)細胞培養(yǎng)。
②僅根據(jù)圖、圖2可知,上述甲、乙、丙三種蛋白中,若缺少 CC(填“A”“B”“C”“D”或“E”)片段所編碼的肽段,則會降低其刺激T淋巴細胞增殖的效果。
(4)DNA連接酶是將兩個DNA片段連接起來的酶,常見的有 E?coliDNA連接酶E?coliDNA連接酶和 T4DNA連接酶T4DNA連接酶,其中既能連接粘性末端又能連接平末端是 T4DNA連接酶T4DNA連接酶。
【考點】基因工程的操作過程綜合;DNA片段的擴增與電泳鑒定.
【答案】編碼蛋白乙的DNA序列首端無ATG,其轉(zhuǎn)錄的mRNA中無起始密碼子AUG;模板DNA;4種脫氧核苷酸;細胞培養(yǎng);C;E?coliDNA連接酶;T4DNA連接酶;T4DNA連接酶
【解答】
【點評】
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