在一定劑量范圍內(nèi)苜蓿中的黃酮對(duì)動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞增殖具有一定促進(jìn)作用。為研究不同濃度苜蓿黃酮對(duì)乳腺上皮細(xì)胞的增殖及其對(duì)乳酸脫氫酶（LDH）活性的影響，科研人員用MTT法以細(xì)胞懸液OD值為觀測(cè)指標(biāo)測(cè)定細(xì)胞增殖能力，進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)研究。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)思路，并根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。
實(shí)驗(yàn)材料與儀器：
用二甲基亞砜（DMSO）配制的濃度為25、50、75和100μ/mL苜蓿黃酮溶液、用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液配制的一定密度的動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞懸液、光電比色計(jì)、MTT法細(xì)胞增殖測(cè)定儀器等
（要求與說(shuō)明：MTT法測(cè)定細(xì)胞增殖具體操作不作要求；乳酸脫氫酶（LDH）活性檢測(cè)不作要求；在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，OD值與細(xì)胞數(shù)成正比；培養(yǎng)過(guò)程中培養(yǎng)液變化忽略不計(jì)；實(shí)驗(yàn)條件適宜）
（1）完善實(shí)驗(yàn)思路
①取若干培養(yǎng)瓶，各加入998mL的細(xì)胞懸液，分為5組，編號(hào)甲～戊，每組5個(gè)重復(fù)。
②甲組：加入2mL二甲基亞礬；實(shí)驗(yàn)組乙～戊：分別加入等量的用二甲基亞砜配制的濃度為25、50、75和100μg/mL的苜蓿黃酮實(shí)驗(yàn)組乙～戊：分別加入等量的用二甲基亞砜配制的濃度為25、50、75和100μg/mL的苜蓿黃酮。
③細(xì)胞培養(yǎng)到第3天和第5天時(shí)，分別用MTT法測(cè)各組細(xì)胞懸液OD值，取平均值并記錄細(xì)胞培養(yǎng)到第3天和第5天時(shí)，分別用MTT法測(cè)各組細(xì)胞懸液OD值，取平均值并記錄。
④實(shí)驗(yàn)第5天，測(cè)各組乳酸脫氫酶（LDH）的活性，取平均值并記錄測(cè)各組乳酸脫氫酶（LDH）的活性，取平均值并記錄。
⑤統(tǒng)計(jì)、比較、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果統(tǒng)計(jì)、比較、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
（2）結(jié)果分析與結(jié)論
苜蓿黃酮對(duì)某動(dòng)物乳腺上皮細(xì)胞增殖及其乳酸脫氫酶（LDH）活性的影響
| 項(xiàng)目 | 時(shí)間/d | 甲組 | 乙組 25μg/mL |
丙組 50μg/mL |
丁組 75μg/mL |
戊組 100μg/mL |
| 細(xì)胞增殖 | 3 | 0.37 | 0.38 | 0.38． | 0.37 | 0.37 |
| 細(xì)胞增殖 | 5 | 0.39 | 0.39 | 0.41* | 0.46* | 0.40* |
| 乳酸脫氫酶活性 | 5 | 1078.80 | 675.60* | 573.21* | 1138.04 | 796.89* |
根據(jù)如表可得實(shí)驗(yàn)結(jié)論：
結(jié)論一：作用時(shí)間較短時(shí)（3天），苜蓿黃酮對(duì)細(xì)胞增殖無(wú)明顯作用；
結(jié)論二：
隨著培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng)（5天），較高濃度的苜蓿黃酮對(duì)細(xì)胞增殖有明顯促進(jìn)作用
隨著培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng)（5天），較高濃度的苜蓿黃酮對(duì)細(xì)胞增殖有明顯促進(jìn)作用
；結(jié)論三：
在較低濃度或較高濃下，苜蓿黃酮顯著提高乳腺上皮細(xì)胞中的乳酸脫氫酶的活性
在較低濃度或較高濃下，苜蓿黃酮顯著提高乳腺上皮細(xì)胞中的乳酸脫氫酶的活性
。（3）實(shí)驗(yàn)分析
細(xì)胞呼吸中，乳酸脫氫酶（LDH）催化的反應(yīng)
不產(chǎn)生
不產(chǎn)生
（填“產(chǎn)生”或“不產(chǎn)生”）ATP，這一催化反應(yīng)發(fā)生在厭氧
厭氧
（填“需氧”或“厭氧”）呼吸中。本實(shí)驗(yàn)中還可用細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH的濃度代表細(xì)胞的受損程度的原因是正常情況下LDH分布在細(xì)胞內(nèi)，只有當(dāng)細(xì)胞受損時(shí)乳酸脫氫酶（LDH）才能釋放出來(lái)，且受損越嚴(yán)重，釋放出來(lái)的LDH越多
正常情況下LDH分布在細(xì)胞內(nèi)，只有當(dāng)細(xì)胞受損時(shí)乳酸脫氫酶（LDH）才能釋放出來(lái)，且受損越嚴(yán)重，釋放出來(lái)的LDH越多
。為減少微生物對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果帶來(lái)的干擾，實(shí)驗(yàn)中的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)基中添加的胎牛血清可采用過(guò)濾（或增加抗生素）
過(guò)濾（或增加抗生素）
（方法）去除雜菌。【考點(diǎn)】探究影響酶活性的條件．
【答案】實(shí)驗(yàn)組乙～戊：分別加入等量的用二甲基亞砜配制的濃度為25、50、75和100μg/mL的苜蓿黃酮；細(xì)胞培養(yǎng)到第3天和第5天時(shí)，分別用MTT法測(cè)各組細(xì)胞懸液OD值，取平均值并記錄；測(cè)各組乳酸脫氫酶（LDH）的活性，取平均值并記錄；統(tǒng)計(jì)、比較、分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果；隨著培養(yǎng)時(shí)間加長(zhǎng)（5天），較高濃度的苜蓿黃酮對(duì)細(xì)胞增殖有明顯促進(jìn)作用；在較低濃度或較高濃下，苜蓿黃酮顯著提高乳腺上皮細(xì)胞中的乳酸脫氫酶的活性；不產(chǎn)生；厭氧；正常情況下LDH分布在細(xì)胞內(nèi)，只有當(dāng)細(xì)胞受損時(shí)乳酸脫氫酶（LDH）才能釋放出來(lái)，且受損越嚴(yán)重，釋放出來(lái)的LDH越多；過(guò)濾（或增加抗生素）
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：29引用：1難度：0.6
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1．小宇正在測(cè)試不同因素對(duì)酶活力的影響，控制實(shí)驗(yàn)組1的pH為8，實(shí)驗(yàn)組2的溫度為40℃，最后將實(shí)驗(yàn)結(jié)果繪制成曲線圖（如圖）。以下能支持小宇實(shí)驗(yàn)結(jié)果的曲線圖是（ ?。?br />
發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：22引用：4難度：0.6 -
2．為了探究pH值和溫度對(duì)酶活性的影響，科學(xué)家進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖所示。如圖表示的是pH值對(duì)植物和人的ATP水解酶活性的影響，右圖表示的是3種脫氫酶（A、B、C）的活性受溫度影響的情況。下列敘述正確的是（ ?。?/h2>發(fā)布：2025/1/19 8:0:1組卷：20引用：1難度：0.7 -
3．胰脂肪酶是腸道內(nèi)脂肪水解過(guò)程中的關(guān)鍵酶，板栗殼黃酮可調(diào)節(jié)胰脂肪酶活性進(jìn)而影響人體對(duì)脂肪的吸收。為研究板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶活性的影響，科研人員進(jìn)行了下列實(shí)驗(yàn)。
（1）胰脂肪酶可以通過(guò)作用將食物中的脂肪水解為甘油和脂肪酸。
（2）為研究板栗殼黃酮的作用及機(jī)制，在酶量一定且環(huán)境適宜的條件下，科研人員檢測(cè)了加入板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶酶促反應(yīng)速率的影響，結(jié)果如圖1。
①圖1曲線中的酶促反應(yīng)速率，可通過(guò)測(cè)量（指標(biāo)）來(lái)體現(xiàn)。
②據(jù)圖1分析，板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶活性具有作用。
（3）圖2中A顯示脂肪與胰脂肪酶活性部位結(jié)構(gòu)互補(bǔ)時(shí)，胰脂肪酶才能發(fā)揮作用，因此酶的作用具有性。圖2中的B和C為板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶作用的兩種推測(cè)的機(jī)理模式圖。結(jié)合圖1曲線分析，板栗殼黃酮的作用機(jī)理應(yīng)為（選填“B”或“C”）。
（4）為研究不同pH條件下板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶活性的影響，科研人員進(jìn)行了相關(guān)實(shí)驗(yàn)，結(jié)果如圖3所示
①本實(shí)驗(yàn)的自變量有。
②由圖3可知，板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶作用效率最高的pH值約為。加入板栗殼黃酮，胰脂肪酶的最適pH變。
③若要探究板栗殼黃酮對(duì)胰脂肪酶作用的最適溫度，實(shí)驗(yàn)的基本思路是。發(fā)布：2024/12/31 2:0:1組卷：20引用：3難度：0.6
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