蜘蛛絲（絲蛋白）被稱為“生物鋼”，有著超強(qiáng)的抗張強(qiáng)度，可制成防彈背心、人造韌帶等。蜘蛛通過在腹部的腺體生成蜘蛛絲，并使用一種名為“噴絲頭”的器官將蛛絲排出體外。由于蜘蛛會(huì)互相攻擊，吃掉同類，因此無法像蠶絲一樣通過養(yǎng)殖大量生產(chǎn)。利用現(xiàn)代生物技術(shù)生產(chǎn)蜘蛛絲不斷取得成功，運(yùn)用基因工程技術(shù)已經(jīng)創(chuàng)造出了“蜘蛛羊”。過程如圖，請(qǐng)回答下列相關(guān)問題：

（1）可利用PCR技術(shù)體外大量擴(kuò)增蛛絲蛋白基因，PCR技術(shù)的原理是

DNA的半保留復(fù)制

DNA的半保留復(fù)制

，PCR過程包括變性、

復(fù)性

復(fù)性

和延伸三步。若在PCR儀中經(jīng)過4次循環(huán)，理論上共消耗引物

30

30

個(gè)。
（2）甲過程需用到的工具有

限制酶、DNA連接酶

限制酶、DNA連接酶

（填工具名稱，缺一不可）。在分子水平上，通常通過

分子雜交技術(shù)

分子雜交技術(shù)

技術(shù)檢測目的基因是否導(dǎo)入受體細(xì)胞。
（3）若成功導(dǎo)入目的基因的轉(zhuǎn)基因羊并沒有產(chǎn)生相應(yīng)的蛛絲蛋白，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是

蛛絲蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒有翻譯

蛛絲蛋白基因沒有轉(zhuǎn)錄或轉(zhuǎn)錄的mRNA沒有翻譯

。
（4）可將

細(xì)胞核移植

細(xì)胞核移植

技術(shù)結(jié)合基因工程等技術(shù)得到具有新性狀的克隆羊。
（5）研究人員發(fā)現(xiàn)若將蛛絲蛋白31號(hào)位的色氨酸替換為酪氨酸，蛛絲韌性可提高50%，利用蛋白質(zhì)工程對(duì)蛛絲蛋白進(jìn)行改造，基本途徑是：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計(jì)

預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)

→推測氨基酸序列→找到對(duì)應(yīng)的脫氧核苷酸。