人絨毛膜促性腺激素（HCG）是一種糖蛋白激素，由α鏈和β鏈（hCGβ）結(jié)合而成。近年研究顯示，hCGβ可表達(dá)于結(jié)腸癌等多種惡性腫瘤細(xì)胞，研發(fā)抗hCGβ疫苗已成為近年來(lái)腫瘤生物治療新的熱點(diǎn)，如圖1為其主要研究路線，請(qǐng)回答下列問題。
（1）女性在妊娠第8d左右，盡管體內(nèi)HCG含量很低，但仍可用抗人絨毛膜促性腺激素單抗制成的“早早孕診斷試劑盒”作出診斷，體現(xiàn)出單克隆抗體具有 特異性強(qiáng)、靈敏度高特異性強(qiáng)、靈敏度高的優(yōu)點(diǎn)。某女性未受孕但被檢測(cè)出血清HCG含量大幅度升高，為明確原因，還需進(jìn)行 腫瘤腫瘤檢測(cè)。
（2）登錄GenBank數(shù)據(jù)庫(kù)，可查詢獲得hCGβ基因組序列，再通過 PCRPCR可特異性地快速擴(kuò)增hCGβ基因。用圖中質(zhì)粒和目的基因構(gòu)建重組質(zhì)粒，應(yīng)選用 ②③②③兩種限制酶（選填編號(hào)①EcoRⅠ②NheⅠ③KpnⅠ④BamHⅠ）切割。
（3）酶切后的載體和目的基因片段，通過 DNA連接DNA連接酶作用后形成混合連接物，導(dǎo)入處于 感受態(tài)感受態(tài)狀態(tài)的大腸桿菌細(xì)胞。為了篩選出轉(zhuǎn)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌，可用酶切法鑒定重組質(zhì)粒，通過電泳檢測(cè)酶切片段判斷是否構(gòu)建成功。選用與構(gòu)建重組質(zhì)粒相同的酶處理重組質(zhì)粒，電泳后得到如圖2所示結(jié)果，據(jù)圖2可判斷 33號(hào)樣品為構(gòu)建成功的重組質(zhì)粒，4號(hào)樣品最可能為 普通質(zhì)粒普通質(zhì)粒。
（4）培養(yǎng)小鼠黑色素瘤細(xì)胞過程中，除無(wú)菌、無(wú)毒的環(huán)境外，還要控制適宜的 溫度、pH、溶解氧溫度、pH、溶解氧（至少答出兩點(diǎn)）和滲透壓等條件。從細(xì)胞結(jié)構(gòu)角度解釋，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)需要考慮滲透壓的原因是 動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，對(duì)培養(yǎng)液的滲透壓比較敏感動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，對(duì)培養(yǎng)液的滲透壓比較敏感
（5）HCG是胚胎著床和妊娠維持所必須的種激素，若對(duì)育齡女性腫瘤患者多次使用抗HCG疫苗，可能引發(fā)的副作用是 不易受孕不易受孕。
【考點(diǎn)】基因工程的操作過程綜合．
【答案】特異性強(qiáng)、靈敏度高；腫瘤；PCR；②③；DNA連接；感受態(tài)；3；普通質(zhì)粒；溫度、pH、溶解氧；動(dòng)物細(xì)胞沒有細(xì)胞壁，對(duì)培養(yǎng)液的滲透壓比較敏感；不易受孕
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布：2024/7/31 8:0:9組卷：10引用：3難度：0.5
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1．下列有關(guān)基因工程技術(shù)和蛋白質(zhì)工程技術(shù)敘述正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：6引用：1難度：0.7 -
2．下列有關(guān)基因工程的敘述，正確的是（ ）
發(fā)布：2024/12/31 5:0:5組卷：3引用：2難度：0.7 -
3．幾丁質(zhì)是許多真菌細(xì)胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強(qiáng)其抗真菌病的能力?；卮鹣铝袉栴}：
（1）基因工程中所用的目的基因可以人工合成，也可以從基因文庫(kù)中獲得。基因文庫(kù)包括和。
（2）生物體細(xì)胞內(nèi)的DNA復(fù)制開始時(shí)，解開DNA雙鏈的酶是。在體外利用PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因時(shí)，使反應(yīng)體系中的模板DNA解鏈為單鏈的條件是。上述兩個(gè)解鏈過程的共同點(diǎn)是破壞了DNA雙鏈分子中的。
（3）DNA連接酶是將兩個(gè)DNA片段連接起來(lái)的酶，常見的有和，其中既能連接黏性末端又能連接平末端的是。當(dāng)幾丁質(zhì)酶基因和質(zhì)粒載體連接時(shí)，DNA連接酶催化形成的化學(xué)鍵是。
（4）提取RNA時(shí)，提取液中需添加RNA酶抑制劑，其目的是。
（5）若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：2引用：2難度：0.6
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