研究發(fā)現(xiàn)人溶菌酶(hLZ)是天然抗生素替代品??茖W(xué)家培育出轉(zhuǎn)人溶菌酶基因山羊,以大規(guī)模生產(chǎn)人溶菌酶(從乳汁中提?。?,過程如圖所示。其中編號①~⑨表示過程;質(zhì)粒S中的基因Leu通過控制相關(guān)酶的合成而影響亮氨酸的合成(亮氨酸是山羊細(xì)胞維持生命活動必不可少的一種必需氨基酸),基因GFP控制合成綠色熒光蛋白。四種限制酶的識別序列及切割位點見下表。請回答下列問題:
限制酶 |
BamH |
Bgl |
Hind |
Xba |
識別序列和切割位點 |
G↓GATCC |
A↓GATCT |
A↓AGCTT |
T↓CTAGA |
(1)物質(zhì)A控制溶菌酶的合成包括轉(zhuǎn)錄和翻譯兩個階段,涉及的場所主要有
細(xì)胞核和核糖體
細(xì)胞核和核糖體
。
(2)過程①通過PCR技術(shù)擴(kuò)增物質(zhì)A,需要的酶是
Taq酶
Taq酶
;過程②需要的限制酶是
BamHⅠ、HindⅡ
BamHⅠ、HindⅡ
;過程③需要的酶是限制酶和
DNA連接酶
DNA連接酶
。
(3)為成功篩選出含重組質(zhì)粒T的成纖維細(xì)胞,質(zhì)粒S中用作標(biāo)記基因的是
基因Leu
基因Leu
和
基因GFP
基因GFP
。為達(dá)到篩選目的,培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分中應(yīng)不含有
亮氨酸
亮氨酸
。將成纖維細(xì)胞培養(yǎng)一段時間后觀察,篩選出
不顯示
不顯示
(選填“顯示”或“不顯示”)綠色熒光的細(xì)胞用于過程⑤。
(4)過程④常用
顯微注射
顯微注射
法,過程⑨為
胚胎移植
胚胎移植
圖中早期胚胎的
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
內(nèi)細(xì)胞團(tuán)
(結(jié)構(gòu))將發(fā)育成轉(zhuǎn)基因羊。