為研究血清及EVO（吳茱萸堿）對細胞增殖的影響及作用機制，科研人員做了以下實驗。請回答下列問題：
Ⅰ、研究不同“層次”血清對細胞增殖的影響。
科研人員將分離出的牛血清裝入專用血清瓶后放入冰箱中直立靜置一段時間。取三根刻度吸管，將血清從上到下輕輕吸成均等的三份，分別裝入消毒后的瓶中，標記為上、中、下，再分別從三個瓶中吸取等量的血清置于另一小瓶中，混合均勻備用。分別取等量的不同“層次”的血清和混合血清加入到新配制的動物細胞培養(yǎng)液中，再接種小鼠上皮細胞（接種細胞密度為5×104個/mL），在適宜條件下培養(yǎng)72h后，進行計數(shù)，結(jié)果如表。
| 組別 | 上 | 中 | 下 | 混 |
| 72h細胞數(shù)/個mL-1 | 9.75×104 | 1.04×105 | 7.5×104 | 1.85×105 |
維持培養(yǎng)液的pH
維持培養(yǎng)液的pH
。（2）培養(yǎng)液中加入動物血清的作用是
提供細胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子
提供細胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子
，還加入一定量抗生素的目的是 防止細菌生長
防止細菌生長
。吸取血清過程中，要嚴格禁止震動和搖晃，目的是 防止不同層次血清混合
防止不同層次血清混合
。（3）如果用血細胞計數(shù)板計數(shù)細胞時進行如圖1所示的操作，統(tǒng)計出來的數(shù)據(jù)比實際值偏
大
大
。
（4）從表中結(jié)果可以看出，不同“層次”的血清對細胞增殖的影響不同。造成這種結(jié)果的主要原因是
不同“層次“血清中營養(yǎng)成分不同
不同“層次“血清中營養(yǎng)成分不同
。（5）根據(jù)實驗結(jié)果，在動物細胞培養(yǎng)過程中，正確使用血清的方法是
將血清充分混勻后再加入到培養(yǎng)液中
將血清充分混勻后再加入到培養(yǎng)液中
。Ⅱ、檢測EVO對人胃癌細胞BGC-823增殖的影響。
（1）①用含動物血清的DME/F-12培養(yǎng)基置于恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)BGC-823。
②取出上述培養(yǎng)的細胞，加入胰蛋白酶制成單細胞懸液，置于加入不同濃度EVO的多孔板中進行培養(yǎng)。
③EVO對BGC-823細胞增殖影響的實驗結(jié)果如圖2。
實驗結(jié)果表明
在一定范圍內(nèi)，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強
在一定范圍內(nèi)，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強
。（2）檢測EVO對BGC-823細胞周期和細胞凋亡相關(guān)蛋白表達的影響，結(jié)果如圖3。根據(jù)上述實驗，可判斷是
p53
p53
細胞周期抑制蛋白，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合，抑制其轉(zhuǎn)錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行。細胞凋亡蛋白Caspase-3表達量。（3）綜上所述，推測EVO對人胃癌細胞的作用機制是
EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合，抑制其轉(zhuǎn)錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合，抑制其轉(zhuǎn)錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
。【考點】動物細胞培養(yǎng)的條件與過程．
【答案】維持培養(yǎng)液的pH；提供細胞生存和增殖所必需的生長調(diào)節(jié)因子；防止細菌生長；防止不同層次血清混合；大；不同“層次“血清中營養(yǎng)成分不同；將血清充分混勻后再加入到培養(yǎng)液中；在一定范圍內(nèi)，隨著EVO濃度的升高，對BGC-823細胞增殖的抑制作用加強；p53；EVO促進細胞周期抑制蛋白的合成，該蛋白能與細胞周期蛋白基因的啟動子結(jié)合，抑制其轉(zhuǎn)錄，從而抑制BGC-823細胞周期的運行
【解答】
【點評】
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發(fā)布：2024/6/27 10:35:59組卷：10引用：2難度：0.6
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1．動物細胞培養(yǎng)和植物組織培養(yǎng)是細胞工程的基本技術(shù)，下列關(guān)于這兩項技術(shù)的敘述，正確的是（ ?。?/h2>
發(fā)布：2024/12/31 1:30:1組卷：29引用：2難度：0.7 -
2．回答與基因工程、動物克隆和胚胎工程有關(guān)的問題：
（1）幾丁質(zhì)是許多真菌細胞壁的重要成分，幾丁質(zhì)酶可催化幾丁質(zhì)水解。通過基因工程將幾丁質(zhì)酶基因轉(zhuǎn)入植物體內(nèi)，可增強其抗真菌病的能力。在進行基因工程操作時，可以從植物體中提取幾丁質(zhì)酶的mRNA，以mRNA為材料可以獲得cDNA，其原理是。若獲得的轉(zhuǎn)基因植株（幾丁質(zhì)酶基因已經(jīng)整合到植物的基因組中）抗真菌病的能力沒有提高，根據(jù)中心法則分析，其可能的原因是。
（2）為了提高動物成纖維細胞克隆形成率，可以選擇適宜的培養(yǎng)基、添加牛血清、以支持生長等措施。當?shù)谝粋€卡氏瓶中的細胞濃度不再增加時，若要細胞繼續(xù)增殖，可采用的方法是。細胞培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)箱中通常要維持一定的CO2濃度，CO2的作用是。
（3）下列關(guān)于胚胎工程的敘述，錯誤的是
A．在動物的飼料中添加一定量的促性腺激素促使超數(shù)排卵
B．若在囊胚期進行胚胎分割，內(nèi)細胞團均等分割，滋養(yǎng)成則不必
C．可以從雌性動物體內(nèi)卵泡處吸取卵泡液，取出卵母細胞進一步培養(yǎng)成熟
D．胚胎成纖維細胞可以用于胚胎干細胞的培養(yǎng)，因為其能分泌抑制細胞分化的物質(zhì)。發(fā)布：2025/1/5 8:0:1組卷：3引用：1難度：0.7 -
3．據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟最新數(shù)據(jù)，2021年全球約5.37億成人患有糖尿病，670萬成人因糖尿病或其并發(fā)癥死亡。如圖是研究人員提出的治療方案，請回答下列問題：
（1）從患者體內(nèi)獲得體細胞后，對其進行的初次培養(yǎng)稱為，培養(yǎng)的細胞在貼壁生長至鋪滿培養(yǎng)皿底時停止分裂，這種現(xiàn)象稱為。一般來說，動物細胞培養(yǎng)需要的條件有（少答出兩點）。
（2）利用PCR技術(shù)擴增正常胰島素基因的前提條件是。目前臨床用的胰島素生效較慢，科學家將胰島素β鏈的第28和29個氨基酸調(diào)換順序，成功獲得了速效胰島素。生產(chǎn)速效胰島素，需要對進行定向改造。
A.胰島素
B.胰島素mRNA
C.胰島素基因
D.胰島
（3）欲檢測胰島類似細胞是否具有胰島B細胞的正常生理功能，可設(shè)計如下實驗：將等量的胰島類似細胞與正常胰島B細胞分別加入兩組相等濃度的培養(yǎng)液中，適宜且相同條件下進行培養(yǎng)，一段時間后分別檢測兩組培養(yǎng)液中。
（4）該治療糖尿病的方法與異體移植相比，突出的優(yōu)點是。發(fā)布：2024/12/31 2:30:2組卷：35引用：2難度：0.6
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