胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)是一種既有促進(jìn)細(xì)胞增殖活性,又有胰島素樣作用的多肽。為了研究IGF-1和生長(zhǎng)激素(GH)對(duì)軟骨細(xì)胞增殖的協(xié)同作用,研究者進(jìn)行了以下實(shí)驗(yàn)。請(qǐng)完善實(shí)驗(yàn)思路、預(yù)測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果并展開分析討論。
材料與用具:兔軟骨細(xì)胞、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液、IGF-1溶液、GH溶液、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡等。
(1)實(shí)驗(yàn)思路:
①取生長(zhǎng)良好的兔軟骨細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)液制備成細(xì)胞懸液,用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù)并記錄;
②取細(xì)胞培養(yǎng)瓶若干,加入等量軟骨細(xì)胞懸液,隨機(jī)分成四組;
A組:不加入任何物質(zhì);
B組:加入適量GH;
C組:加入適量IGF-1;
D組:加入等量且適量的GH和IGF-1加入等量且適量的GH和IGF-1。
③將各組培養(yǎng)瓶放入 細(xì)胞培養(yǎng)箱細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h、36h、48h、72h后觀察并計(jì)數(shù)、記錄。
(2)實(shí)驗(yàn)結(jié)果:發(fā)現(xiàn)D組的軟骨細(xì)胞增殖效果最好,請(qǐng)用坐標(biāo)曲線圖表示實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
(3)分析和討論:
①血液中IGF-1是一種生長(zhǎng)刺激因子,同時(shí)具有類胰島素樣的作用,可以促進(jìn)組織細(xì)胞 攝取、利用、儲(chǔ)存葡萄糖攝取、利用、儲(chǔ)存葡萄糖,從而為細(xì)胞增殖提供必要的條件。
②根據(jù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析可知軟骨細(xì)胞上有 生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1)的受體。為了進(jìn)一步研究IGF-1促進(jìn)軟骨細(xì)胞增殖的機(jī)理,可將加入 同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸細(xì)胞培養(yǎng)液中,根據(jù)放射性的量跟蹤DNA的含量變化,分析其是否促進(jìn)DNA復(fù)制。
③科研人員發(fā)現(xiàn)在機(jī)體中,生長(zhǎng)激素(GH)可刺激肝臟細(xì)胞產(chǎn)生IGF-1,現(xiàn)將正常小鼠和IGF-1基因缺失小鼠分組飼養(yǎng)后,再檢測(cè)體內(nèi)GH水平,結(jié)果顯示IGF-1基因缺失小組的GH水平要高于正常小鼠,推測(cè)可能的原因是IGF-1對(duì)垂體有 負(fù)反饋調(diào)節(jié)負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用。
【考點(diǎn)】動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的條件與過(guò)程.
【答案】用血球計(jì)數(shù)板在顯微鏡下計(jì)數(shù);加入等量且適量的GH和IGF-1;細(xì)胞培養(yǎng)箱;攝取、利用、儲(chǔ)存葡萄糖;生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子1(IGF-1);同位素標(biāo)記的胸腺嘧啶脫氧核苷酸;負(fù)反饋調(diào)節(jié)
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
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發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:10引用:1難度:0.6
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