蛋白激酶是一類(lèi)催化蛋白質(zhì)磷酸化反應(yīng)的酶,能使ATP上的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移并結(jié)合到蛋白質(zhì)分子中某些特定氨基酸上,從而改變蛋白質(zhì)的活性。ADP-Glo是一種檢測(cè)蛋白激酶活性的方法,其過(guò)程如圖所示。
(1)在蛋白激酶作用下,ATP分子中
末端
末端
的磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到蛋白質(zhì)上。蛋白質(zhì)磷酸化后活性改變,原因是 蛋白質(zhì)被磷酸化后空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化
蛋白質(zhì)被磷酸化后空間結(jié)構(gòu)發(fā)生變化
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(2)步驟2之前,需使用ATP消解試劑將所有剩余的ATP消耗,目的是 保證步驟2中的ATP完全由步驟1中的ADP生成,避免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果
保證步驟2中的ATP完全由步驟1中的ADP生成,避免干擾實(shí)驗(yàn)結(jié)果
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(3)根據(jù)步驟2的檢測(cè)結(jié)果,推測(cè)物質(zhì)X是 ATP合成酶
ATP合成酶
,在綠色植物葉肉細(xì)胞中,該物質(zhì)存在的場(chǎng)所有 細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體、葉綠體
細(xì)胞質(zhì)基質(zhì)、線粒體、葉綠體
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(4)有人提出:一定濃度的Hg2+會(huì)導(dǎo)致蛋白激酶失活。請(qǐng)?jiān)O(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)對(duì)上述觀點(diǎn)進(jìn)行驗(yàn)證,寫(xiě)出實(shí)驗(yàn)思路 將一定量的蛋白激酶均分為兩組,一組用一定濃度的Hg2+處理,另一組不處理,然后用ADP-Glo檢測(cè)兩組蛋白激酶的活性
將一定量的蛋白激酶均分為兩組,一組用一定濃度的Hg2+處理,另一組不處理,然后用ADP-Glo檢測(cè)兩組蛋白激酶的活性
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