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在真核生物體內(nèi)普遍存在一種針對(duì)外源RNA的RNA沉默機(jī)制來抵御病毒的入侵,其過程主要包括:真核細(xì)胞能識(shí)別入侵病毒的RNA使其成為雙鏈RNA,經(jīng)剪切加工后,來自雙鏈RNA中的一些單鏈RNA片段(siRNA)與其他蛋白質(zhì)形成RNA誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC),該復(fù)合體可以特異性地與病毒RNA結(jié)合并將其降解。番木瓜是嶺南四大名果之一,由于其極易受單鏈RNA的環(huán)斑病毒侵染從而導(dǎo)致減產(chǎn)。研究人員將環(huán)斑病毒(HA株系)的衣殼蛋白基因?qū)敕竟嫌鷤M織內(nèi),獲得了首個(gè)轉(zhuǎn)基因抗病毒品種R?;卮鹣铝袉栴}。
(1)在獲取環(huán)斑病毒衣殼蛋白基因的過程中,研究人員需要從序列數(shù)據(jù)庫中獲取環(huán)斑病毒的衣殼蛋白基因序列信息,根據(jù)衣殼蛋白基因兩側(cè)保守區(qū)域設(shè)計(jì)出用于PCR反應(yīng)的
引物
引物
。然后從環(huán)斑病毒中提取總RNA,經(jīng)
逆轉(zhuǎn)錄
逆轉(zhuǎn)錄
后得到DNA,作為PCR反應(yīng)的
模板DNA
模板DNA
,最后用
瓊脂糖凝膠電泳
瓊脂糖凝膠電泳
方法鑒定PCR產(chǎn)物。
(2)當(dāng)轉(zhuǎn)基因抗病毒品種R被環(huán)斑病毒促染后,相關(guān)的siRNA通過
堿基互補(bǔ)配對(duì)
堿基互補(bǔ)配對(duì)
原則與病毒RNA結(jié)合,經(jīng)過
誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)
誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC)
對(duì)RNA的降解,抑制病毒增殖。
(3)品種R對(duì)HA株系的環(huán)斑病毒具有良好的抗性,但對(duì)我國華南地區(qū)的其他株系的環(huán)斑病毒抗性不強(qiáng)。導(dǎo)入環(huán)斑病毒(HA株系)基因y的品種Y對(duì)不同株系環(huán)斑病毒具有更廣譜的抗性。推測(cè)與衣殼蛋白基因相比,基因y
堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因?qū)敕竟虾?,具有廣泛的病毒株系抗性
堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因?qū)敕竟虾?,具有廣泛的病毒株系抗性
。

【答案】引物;逆轉(zhuǎn)錄;模板DNA;瓊脂糖凝膠電泳;堿基互補(bǔ)配對(duì);誘導(dǎo)沉默復(fù)合體(RISC);堿基序列更加保守(即不同病毒株系的y基因序列相同),作為目的基因?qū)敕竟虾螅哂袕V泛的病毒株系抗性
【解答】
【點(diǎn)評(píng)】
聲明:本試題解析著作權(quán)屬菁優(yōu)網(wǎng)所有,未經(jīng)書面同意,不得復(fù)制發(fā)布。
發(fā)布:2024/6/27 10:35:59組卷:23引用:3難度:0.5
相似題
  • 1.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定 DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題:菁優(yōu)網(wǎng)
    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、
     
     
    。
    (2)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn) DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的半保留復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長(zhǎng)的分子,可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA聚合酶、
     
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體 DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     
    。
    (3)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知 ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段,將以上子鏈 DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長(zhǎng)度的子鏈 DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA 聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     
    。
    A.dGTP,dATP,dTTP
    B.dGTP、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP,dATP,dTTP,dCTP
    D.ddGTP,ddATP,ddTTP,ddCTP
    (4)如圖3為形成單鏈DNA后,再進(jìn)行PCR擴(kuò)增示意圖。
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    催化①過程的酶是
     
    ;核酸酶H的作用是
     
    。如果某RNA單鏈中一共有80個(gè)堿基,其中C有15個(gè),A與U之和占該鏈堿基含量的40%,經(jīng)過以上若干過程后共獲得8個(gè)雙鏈 DNA,此過程中至少需加入G參與組成的核苷酸數(shù)量為
     
    (以上過程不考慮引物)。

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:19引用:1難度:0.7
  • 2.PCR是利用體內(nèi)DNA復(fù)制的原理,進(jìn)行生物體外復(fù)制特定DNA片段的核酸合成技術(shù)。請(qǐng)回答有關(guān)問題:
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    (1)PCR反應(yīng)的基本步驟是變性、復(fù)性、
     

    (2)雙脫氧核苷三磷酸(ddNTP)與脫氧核苷三磷酸(dNTP)的結(jié)構(gòu)如圖2所示。已知ddNTP按堿基互補(bǔ)配對(duì)的方式加到正在復(fù)制的子鏈中后,子鏈的延伸立即終止?,F(xiàn)主有一些序列為5'-GCCTAAGATCGCA-3'的DNA分子單鏈片段,通過PCR技術(shù)獲得以堿基“C”為末端(3'為堿基C)不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段,將以上子鏈DNA片段進(jìn)行電泳分離可得到
     
    種不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段。為使實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行,在PCR反應(yīng)管中除了單鏈模板、引物、DNA聚合酶和相應(yīng)的緩沖液等物質(zhì)外,還需要加入下列哪組原料
     
    。
    A.dGTP、dATP、dTTP
    B.dGTR、dATP、dTTP、dCTP、ddCTP
    C.dGTP、dATP、dTTP、dCTP
    D.ddGTP、ddATP、ddTTP、ddCTP
    (3)科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)DNA聚合酶只能催化
     
    方向的聚合反應(yīng)。圖1表示細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程,有一條子鏈?zhǔn)窍群铣啥痰腄NA片段(稱為岡崎片段),再形成較長(zhǎng)的分子,可推測(cè)參與以上過程的酶有DNA連接酶
     
    、
     
    。在PCR過程中無岡崎片段形成,原因是細(xì)胞內(nèi)染色體DNA的復(fù)制過程特點(diǎn)是
     
    ,PCR過程的特點(diǎn)是
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:12引用:1難度:0.7
  • 3.Sanger法DNA測(cè)序技術(shù)的核心原理:由于雙脫氧核苷酸(ddNTP)的2'和3'都不含羥基,其在DNA的合成過程中不能形成磷酸二酯鍵,因此可以中斷DNA分子合成反應(yīng)。在四個(gè)含有4種脫氧核苷酸(dNTP)的DNA體外合成反應(yīng)體系中分別加入一定比例帶有放射性同位素標(biāo)記的ddNTP(分別為:ddATP,ddCTP,ddGTP和ddTTP),在PCR過程中復(fù)制隨機(jī)終止,產(chǎn)生四組不同長(zhǎng)度的一系列終止處帶有標(biāo)記的DNA片段。然后在變性凝膠(加入尿素等堿性物質(zhì))上進(jìn)行電泳和放射自顯影后,可以根據(jù)電泳帶的位置確定待測(cè)分子的DNA序列,具體過程見圖。
    注:ddA是ddATP的縮寫形式。
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    (1)如圖1中Ⅰ過程橫線①中應(yīng)該加入的物質(zhì)是
     
    ,dNTP中dATP與ATP在組成上的區(qū)別是
     
    ,為什么該過程中需要添加引物?
    (2)材料中提到“在變性凝膠上進(jìn)行電泳……”,請(qǐng)解釋“變性”
     
    ,為什么要變性處理?
     

    (3)如果電泳結(jié)果如圖2所示,請(qǐng)寫出待測(cè)DNA分子的序列
     
    。
    (4)某同學(xué)要通過PCR技術(shù)獲得被32P標(biāo)記且以堿基“C”為末端、不同長(zhǎng)度的子鏈DNA片段,在反應(yīng)管中已經(jīng)有模板、引物、酶和相應(yīng)緩沖液等等,還需加入哪些原料
     

    發(fā)布:2024/10/26 17:0:2組卷:16引用:1難度:0.7
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